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Lipoclean测定猪肉中19种兽药多残留的 UPLC/MS/MS分析

2019-12-17 16:32:54
逗点生物
526
最后编辑:逗点生物 于 2019-12-17 16:39:06
简介:Lipoclean测定猪肉中19种兽药多残留的 UPLC/MS/MS分析

1 样品提取 

1) 称取猪肉2.0g于50mL离心管中,加入浓度为100ppm氟尼辛D3内标物40μL,再2.0mL 0.1M Na 2 EDTA溶液,涡旋混匀 1min,冰浴超声提取10min,于4℃ 9000r/min下离心5min,移 上清液于另一15mL离心管中; 

2) 再加入7.0mL 2%甲酸乙腈于50mL离心管中,涡旋5min,于 4℃ 9000r/min下离心5min,合并两次上清液,用2%甲酸乙腈定 容至10mL; 

3) 将合并定容后的上清液,于4℃ 9000r/min下离心5min,待净 化。

2 样品净化 

1) 上样:取2.5mL待净化液过柱,重力作用下洗脱,收集流出液; 

2) 洗脱:再加625μL 80%乙腈水进行二次洗脱,收集流出液,施 加真空排空液体,合并两次流出液; 

3) 将0.5mL样品洗脱液和0.3mL H2O加入到样品瓶中,涡旋混匀, 过0.22μm有机滤膜供上机测试

3 标曲配制 

用空白基质配制标曲,内标法定量,标曲浓度范围0.5~100ppb。 

4. 仪器测试条件(仅供参考) 

色谱条件 

仪器:UPLC/MS/MS (Thermo Fisher TQS Endura ) 

色谱柱: ® CommaSil ODS(2.1mm×50 mm, 1.8 μm) 

柱温:30 ℃ 

进样量:8 μL 

流速:0.4 mL/min 

流动相:A: 水(0.1%甲酸) B: 甲醇(0.1%甲酸) 

表1 梯度洗脱

质谱条件 离子源:HESI    电喷雾电压:3500 V 

鞘气压力:40 arb              辅气压力:2 arb 

离子传输管:380 ℃          辅气温度:420 ℃

5 注意事项 

1. 为防止由螯合引起的四环素化合物的损失,使用0.1M Na2EDTA 缓冲液进行水溶液萃取。 

2. 为改善与固体残留物的相分离,进一步降低温度对部分目标物 的影响(如四环素类),建议使用低温离心(4℃)。 

3. 为进一步确保蛋白及部分固体残留物的有效去除,建议使用高 速离心(9000r/min)。 

4. 建议采用加入内标物,采用空白基质配制标曲,有利于校正目 标分析物的回收率。

实验结果 

表2. 不同品牌猪肉中19种兽残加标回收实验结果(加标浓度 16ng/mL,n=3)