固相萃取
- 2017-01-06 11:22:07
- admin
- 8350
- 最后编辑：逗点生物 于 2020-06-03 10:33:05
固相萃取柱（SPE 柱）常用问答
固相萃取柱规格的选择，上样量与洗脱体积如何确定？
对于反相、正相和吸附型固相萃取柱来说，被萃取样品的质量不超SPE柱填料的5%；离子交换型的固相萃取柱，必须考虑离子交换的容量。
| 规格 | 最大上样量 | 最小洗脱体积 |
|---|---|---|
| 100mg/1mL | 5mg | 250µL |
| 200mg/3mL | 10mg | 500µL |
| 500mg/6mL | 25mg | 1.2mL |
| 1g/6mL | 50mg | 2.4mL |
常见问题及解决方法
| 出现问题 | 可能原因 | 解决办法 |
|---|---|---|
| 回收率低 | 柱子类型选择不当 | 选择对目标组分具有更强选择性的SPE柱 |
| 柱子活化不当 | 正相填料： 正己烷等，1-3倍柱床体积。 离子交换填料： 甲醇、乙腈或异丙醇等与水互溶的极性溶剂，1倍柱床体积 |
|
| 洗脱溶剂选择不当 | 选择极性更强的溶剂进行洗脱 | |
| 洗脱不完全 | 增加洗脱的溶剂用量 | |
| 是否过载 | 选择更大的SPE柱或减少上样量 | |
| 重现性差 | 上样前柱子出现干涸 | 重新活化SPE柱 |
| 洗脱液流速过快 | 控制洗脱液流速，≤1mL/min | |
| 目标物发生降解 | 选择合适SPE柱或加入适当的缓冲液保证目标物的稳定性 | |
| SPE柱过载 | 选择更大的SPE柱或减少上样量 | |
| 淋洗溶剂洗脱能力过强 | 降低淋洗溶液强度 | |
| 杂质过多 | 杂质与目标物同时被洗脱 | 选择合适的淋洗液，洗脱之前先去除杂质 选择对目标组分专属更强的SPE柱 |
| 杂质来自SPE柱 | 活化前先用洗脱液冲洗柱子 | |
| SPE柱流速过 慢或堵塞 | 样品存在较多不溶物 | 上样前对样品进行离心或选择溶解度更大的溶剂 |
| 样品黏度过大 | 对样品进行稀释或选择溶解度更大的溶剂 |
Update Required
To play the media you will need to either update your browser to a recent version or update your Flash plugin.
