金黄色葡萄球菌的典型特征及常用鉴别方法
- 2026-06-30 14:33:20
- 逗点生物
金黄色葡萄球菌的典型特征及常用鉴别方法
金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）是食品、化妆品、药品及环境微生物检验中常见的条件致病菌之一，也是凝固酶阳性葡萄球菌的代表菌种。该菌可产生多种酶和毒力因子，在适宜条件下可形成具有鉴别意义的典型菌落。实际检测时，应结合样品类型和适用标准选择检验流程，食品样品通常可参考 GB 4789.10 等现行标准，进出口、药品、化妆品或其他样品则应按相应标准执行。
一、基本形态特征
金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性球菌，显微镜下多呈葡萄串状排列，也可见单个、成对或短链状排列；通常无芽胞、无鞭毛。经革兰氏染色后菌体呈紫色，这是初步鉴别葡萄球菌属的重要依据之一。但仅凭显微形态不能确认菌种，还需结合选择性培养、溶血特征、酶学反应及血浆凝固酶试验进行综合判断。
二、常用培养基上的典型菌落表现
| 培养基 | 典型表现 | 鉴别意义 |
|---|---|---|
| Baird-Parker 琼脂（B-P 平板） | 菌落圆形、光滑、凸起、湿润，直径多为 2～3 mm；灰黑色至黑色，有光泽，边缘可呈浅色；周围常见不透明沉淀圈，外侧可出现清晰透明带 | 亚碲酸盐还原使菌落变黑，卵磷脂酶等作用形成沉淀圈或透明带，是筛选金黄色葡萄球菌的重要特征 |
| 血琼脂平板 | 菌落较大，圆形、光滑、湿润，可呈金黄色、淡黄色或白色；部分菌株周围可见透明溶血环 | 可观察溶血现象，但溶血强弱受菌株、血源和培养条件影响，不宜单独作为确认依据 |
| Chapman 培养基 / 甘露醇高盐琼脂 | 耐受高盐并发酵甘露醇时，菌落及周围培养基可变黄 | 高盐抑制多数非耐盐菌，甘露醇发酵产酸使酚红指示剂变黄 |
| DNA 酶琼脂 / 甲苯胺蓝-DNA 琼脂 | DNA 酶阳性菌株可在菌落周围形成透明圈或变色晕圈；甲苯胺蓝-DNA 体系常见粉红色反应圈 | 用于检测 DNA 酶或耐热核酸酶活性，可作为可疑菌株的辅助鉴别 |
| Vogel-Johnson 琼脂 | 典型菌落可呈黑色，周围常因甘露醇发酵出现黄色区域 | 亚碲酸盐还原和甘露醇发酵共同提供选择与鉴别信息 |
在 Baird-Parker 琼脂上，典型金黄色葡萄球菌菌落常具有“黑色、有光泽、湿润、带沉淀圈或透明带”的组合特征。用接种针触及菌落时，部分典型菌落可呈黄油样黏稠感。需要注意的是，从长期冷冻、脱水或受损样品中分离出的菌株，菌落颜色可能偏浅，表面也可能较粗糙、较干燥；部分不分解脂肪的菌株可能缺少明显不透明圈或透明带。因此，菌落外观只能作为筛选依据，不能直接作为最终确认结果。
三、血浆凝固酶试验：确认金黄色葡萄球菌的关键步骤
血浆凝固酶试验是确认金黄色葡萄球菌的重要方法之一。常用操作为：挑取可疑菌落接种适宜肉汤，培养后取一定量肉汤培养物，与兔血浆充分混匀，置 36 ℃±1 ℃培养，并定时观察凝块形成情况。若试管内形成明显凝块，且倾斜或倒置时内容物不流动，可判定为凝固酶阳性。
试验时应同时设置已知阳性对照和阴性对照，以排除血浆质量、培养物活性或操作误差造成的误判。若反应迟缓或结果不典型，应延长观察至标准规定时间，并结合其他确认试验判断。
四、耐热核酸酶与 DNA 酶反应的辅助价值
当菌落形态、革兰氏染色和血浆凝固酶结果不完全一致，或样品背景菌复杂时，可增加 DNA 酶或耐热核酸酶试验。金黄色葡萄球菌通常可产生 DNA 酶，部分检测体系中阳性反应表现为菌落周围透明圈、粉红色晕圈或其他特征性变色。不同商品化培养基使用的指示剂不同，阳性表现也会有差异，因此结果解释应以对应产品说明书和检验标准为准。
耐热核酸酶试验对受损菌株或疑似凝固酶阳性葡萄球菌的进一步确认有一定价值。典型阳性反应通常表现为孔周围出现明显反应晕圈，可与阴性对照区分。
五、判定时应避免的常见误区
第一，不能只看 Baird-Parker 平板上的黑色菌落就直接判定为金黄色葡萄球菌。部分其他葡萄球菌或杂菌也可能还原亚碲酸盐形成深色菌落，必须进行确认试验。
第二，不能把“血琼脂上白色菌落并有溶血环”作为唯一标准。金黄色葡萄球菌可呈金黄色、淡黄色或白色，溶血现象也可能因菌株差异和培养条件而变化。
第三，甘露醇高盐琼脂变黄提示菌株耐盐并能发酵甘露醇，但并非金黄色葡萄球菌的专属反应。部分其他葡萄球菌也可能出现类似表现。
第四，DNA 酶阳性、耐热核酸酶阳性或凝固酶阳性均应结合完整流程解释。对于食品、药品、化妆品等不同样品，最终判定应以适用标准规定的确认程序为准。
六、小结
金黄色葡萄球菌的典型鉴别应遵循“选择性分离—菌落观察—染色镜检—凝固酶确认—必要时辅助试验”的思路。Baird-Parker 琼脂上的灰黑色至黑色、有光泽、带沉淀圈或透明带的菌落，是最具代表性的筛选特征；革兰氏阳性球菌形态和血浆凝固酶阳性，则是进一步确认的重要依据。对于受损样品、背景菌复杂样品或非典型菌落，应增加 DNA 酶、耐热核酸酶等试验，以提高判断的准确性和可靠性。
