单核细胞增生李斯特氏菌的生物学特性

单核细胞增生李斯特氏菌（Listeria monocytogenes），简称单增李斯特菌，是食品微生物检验中重点关注的食源性致病菌之一。该菌广泛存在于自然界，可污染乳及乳制品、肉制品、水产品、即食食品和冷藏食品。与许多食源性细菌不同，单增李斯特菌具有较强的环境适应性，尤其能在低温条件下缓慢增殖，因此冷链食品和即食食品是其风险控制的重点对象。

一、形态与染色特征

单增李斯特菌为革兰氏阳性短杆菌或近似球杆菌，菌体较小，常见大小约为 0.4～0.5 μm × 0.5～2.0 μm。显微镜下可呈单个、短链、V 形排列，也可见细胞沿长轴方向平行排列。该菌无芽胞，通常无荚膜，为兼性厌氧菌，在普通营养条件下即可生长。

需要注意的是，陈旧培养物或生长状态不良的培养物中，菌体可能出现丝状延长，革兰氏染色也可能变得不典型，甚至呈现革兰氏不稳定现象。因此，镜检结果应尽量采用新鲜培养物，不宜仅凭陈旧培养物的染色结果进行判断。

二、运动性与培养温度特征

单增李斯特菌最具鉴别意义的特征之一是低温下的运动性。该菌在 20～25 ℃时常表现出活跃运动，肉汤培养物在显微镜下可见典型的“翻跟斗样运动”；在半固体动力培养基中穿刺培养，可出现由穿刺线向外扩散的“伞状”或“倒伞状”生长。相比之下，在 37 ℃时鞭毛形成减少，运动性明显减弱，因此观察动力时通常以室温或 20～25 ℃培养条件更合适。

该菌最适生长温度一般为 30～37 ℃，但对温度适应范围较宽，可在冷藏条件下缓慢生长。这一特性使其在冷藏即食食品中具有较高风险，也解释了为什么单增李斯特菌检测常被列为冷链食品、熟肉制品、乳制品和即食食品微生物控制的重要项目。

三、培养基上的典型菌落表现

在普通固体培养基上，单增李斯特菌早期菌落通常较小、透明或半透明，边缘整齐，外观呈露滴状；随着培养时间延长，菌落逐渐增大并变得不透明。

在 5%～7% 血琼脂平板上，菌落多为灰白色、小而圆、表面光滑，周围可见较窄的 β 溶血环。单增李斯特菌的溶血环通常不宽，观察时应与阴性菌株和阳性对照进行比较，避免将弱溶血或培养基背景误判为阳性。

在 TSA-YE 琼脂，即含 0.6% 酵母浸粉的胰酪大豆琼脂上，通过解剖镜或斜射光观察，典型菌落可呈蓝灰色、灰蓝色或带珍珠样光泽。这一观察方法可作为初筛参考，但不能替代后续生化鉴定或确认试验。

在 Oxford、PALCAM 等选择性分离培养基上，单增李斯特菌通常可水解七叶苷，与铁盐反应后使菌落及周围区域出现黑色或黑褐色变化。需要强调的是，七叶苷阳性并非单增李斯特菌独有，其他李斯特氏菌也可能出现类似表现，因此选择性平板上的典型菌落仍需进一步鉴定。

四、主要生化反应特征

单增李斯特菌一般表现为触酶阳性、氧化酶阴性，能发酵多种糖类，通常产酸不产气。其鉴别中较有价值的生化组合包括：葡萄糖阳性、鼠李糖阳性、七叶苷水解阳性、马尿酸盐水解阳性、精氨酸水解阳性；木糖、甘露醇、尿素、吲哚、硫化氢、硝酸盐还原和明胶液化多为阴性。VP 试验和甲基红试验通常为阳性。

原文中列出的乳糖、蔗糖、山梨醇等糖发酵结果，在不同菌株、培养基和商品化鉴定系统中可能存在差异，不建议作为单独确认依据。实际检测中应以适用标准规定的鉴定流程为准，必要时结合显色培养基、生化鉴定试剂盒、CAMP 试验或分子生物学方法进行确认。

五、血清型与流行病学意义

根据菌体 O 抗原和鞭毛 H 抗原，单增李斯特菌可分为多个血清型，常见血清型包括 1/2a、1/2b、1/2c、3a、3b、3c、4a、4b、4ab、4c、4d、4e 和 7 等。其中，与食品污染和人类病例关系较密切的主要包括 1/2a、1/2b、1/2c 和 4b，尤其 1/2a 和 4b 在食品安全监测和暴发事件分析中较受关注。

不过，血清型分析主要用于流行病学追踪、污染来源分析和风险评估，并不是一般样品常规初筛的必需步骤。对于生产企业和第三方检测实验室而言，日常检测更关注“是否检出”和“计数结果是否符合限量要求”。

六、理化抵抗力与控制要点

单增李斯特菌不形成芽胞，但相较许多无芽胞细菌，其对低温、盐分、干燥和一定酸碱环境的耐受性较强。该菌可在较宽 pH 范围内生存或生长，对高盐环境也具有一定耐受能力，因此不能仅依赖冷藏或轻度盐渍来控制风险。

热处理仍是控制单增李斯特菌的重要手段。常规充分加热可有效杀灭该菌，实验室培养基和污染材料处理则可采用湿热灭菌等标准灭菌程序。生产现场控制中，除加热外，还应重视熟制后污染、冷却环节污染、包装环境污染和冷藏贮存期间的增殖风险。

抗生素敏感性不宜作为食品微生物检验中的常规确认指标。不同来源菌株的耐药性可能存在差异，相关检测应按药敏试验规范另行开展，不应混入常规培养鉴别文章中作为判定依据。

七、小结

单核细胞增生李斯特氏菌的典型生物学特征可概括为：革兰氏阳性短杆菌、无芽胞、兼性厌氧、低温可生长、20～25 ℃运动性明显、半固体培养呈伞状生长、血琼脂上形成窄小 β 溶血环、触酶阳性、氧化酶阴性、七叶苷水解阳性、鼠李糖阳性而木糖阴性。实际检测时，应避免只依据单一菌落形态或单项生化反应作出结论，而应结合选择性增菌、选择性分离、菌落特征、动力试验、溶血试验及生化或分子确认结果进行综合判定。