白色念珠菌检验的结果判断与确认要点

白色念珠菌（Candida albicans）是药品、化妆品、食品及环境样品微生物检验中常见的条件致病性酵母菌。其检验结果不能仅凭普通平板上的“白色酵母样菌落”直接判定，而应结合分离培养、显色培养、形态学观察和芽管试验等结果综合确认。对于供试品检验，判读原则应是：未见疑似菌落可判为未检出；出现疑似菌落时，必须继续确认；确认结果不符合白色念珠菌典型特征时，方可判为未检出白色念珠菌。

一、沙氏葡萄糖琼脂上的初步观察

白色念珠菌在沙氏葡萄糖琼脂培养基上通常生长良好，菌落多呈乳白色、奶油色，偶见淡黄色；表面光滑、湿润、圆形、凸起，具有典型酵母样外观。培养时间延长后，菌落可逐渐增大，颜色变深，质地变厚或变硬，部分菌落表面可出现皱褶。

需要注意的是，沙氏葡萄糖琼脂属于真菌常用分离培养基，适合霉菌和酵母菌生长，但选择性和鉴别性有限。许多非白色念珠菌的酵母也可形成白色、乳白色或淡黄色菌落。因此，在沙氏葡萄糖琼脂上观察到疑似菌落，只能提示“可能存在酵母样真菌”，不能直接确认为白色念珠菌。

若平板上无菌落生长，或生长菌落明显不符合酵母样菌落特征，可按相应检验方法判定供试品未检出白色念珠菌。若出现乳白色、奶油色、淡黄色、湿润光滑的疑似酵母样菌落，应挑取 2～3 个典型或可疑菌落继续进行鉴别。

二、念珠菌显色培养基上的判读

念珠菌显色培养基利用不同念珠菌种的酶活性差异，使其形成不同颜色的菌落。白色念珠菌在多数念珠菌显色培养基上通常形成绿色、翠绿色或蓝绿色菌落，培养时间一般为 24～48 h，必要时可延长至 72 h。若转接后未见绿色或翠绿色疑似菌落，可结合前期结果判定供试品未检出白色念珠菌。

但显色培养基的结果仍属于筛选或初步鉴别。不同厂家培养基的底物体系和判读颜色存在差异，同一菌株在不同培养时间、接种量和培养条件下也可能出现颜色深浅变化。更重要的是，部分近缘念珠菌也可能出现类似绿色菌落，少数白色念珠菌菌株也可能显色不典型。因此，显色平板上出现绿色或翠绿色菌落时，应进一步进行形态学观察和芽管试验，而不能仅凭颜色报出阳性结果。

三、1% 吐温 80 玉米琼脂上的形态观察

对显色培养基上符合或疑似的菌落，可接种至 1% 吐温 80 玉米琼脂培养基，培养 24～48 h 后进行显微镜观察。该培养基营养相对贫乏，吐温 80 可促进白色念珠菌形成较典型的形态结构，便于观察假菌丝、芽生孢子和厚膜孢子。

白色念珠菌在该培养基上通常可形成假菌丝，假菌丝两侧可见芽生孢子，部分菌株可见圆形、厚壁、折光性较强的厚膜孢子。厚膜孢子是白色念珠菌较有鉴别意义的形态特征之一，但其形成受培养基、温度、培养时间和菌株状态影响。若培养条件不合适，厚膜孢子可能不明显，因此形态学观察也应与其他确认试验结合判断。

四、芽管试验的正确判读

芽管试验是白色念珠菌常用的快速鉴别方法之一。一般做法是挑取新鲜培养物，接种于无菌血清中，置 35～37 ℃培养约 1～3 h，然后取一滴培养液制成湿片，显微镜下观察。白色念珠菌阳性时，可见由酵母样细胞直接伸出的短小芽管，芽管基部通常无明显缢缩。

芽管与普通芽生孢子应严格区分。普通芽生孢子在母细胞连接处常有明显缢缩，而典型芽管基部不收缩或收缩不明显，呈管状延伸。判读时应观察多个视野，并设置阳性对照和阴性对照。若未见典型芽管，不能单凭一次阴性结果完全排除，尤其在菌龄过老、接种量过大、血清质量不佳或培养时间不合适时，芽管形成可能受到影响。

五、阴性与阳性结果的综合判断

白色念珠菌的结果判断应遵循逐级确认原则。若沙氏葡萄糖琼脂或规定分离培养基上无疑似酵母样菌落，可判定未检出白色念珠菌。若有疑似菌落，但转接念珠菌显色培养基后未见绿色或翠绿色疑似菌落，可判定未检出白色念珠菌。若显色培养基出现绿色或翠绿色菌落，则应继续进行玉米琼脂形态观察和芽管试验。

若疑似菌经染色或镜检显示并非革兰氏阳性酵母样细胞，或未见白色念珠菌典型的假菌丝、厚膜孢子和芽管等确认特征，可判定供试品未检出白色念珠菌。若菌落形态、显色反应、显微形态和芽管试验均符合白色念珠菌特征，则可按相应检验方法判定检出白色念珠菌。

六、常见误判点

第一，不能把沙氏葡萄糖琼脂上的乳白色菌落直接判为白色念珠菌。许多酵母菌都可呈现相似菌落形态。

第二，不能把显色培养基上的绿色菌落直接等同于白色念珠菌。显色培养基提高了筛选效率，但仍需后续确认。

第三，芽管试验应使用新鲜培养物，并控制培养时间。培养过久可能出现假菌丝延伸，增加误判风险。

第四，厚膜孢子并非所有条件下都稳定形成。若形态观察不典型，应结合显色反应、芽管试验和必要的生化或分子鉴定结果综合判断。

第五，不建议依靠“浓酵母气味”作为主要判定依据。气味具有主观性，也不符合实验室安全操作中尽量减少暴露的原则，只能作为非常弱的辅助观察信息。

七、小结

白色念珠菌的结果判断应以“疑似筛选 + 确认鉴定”为核心。沙氏葡萄糖琼脂上的乳白色酵母样菌落只能作为初筛线索；念珠菌显色培养基上的绿色或翠绿色菌落可进一步提示疑似白色念珠菌；1% 吐温 80 玉米琼脂上的假菌丝、芽生孢子和厚膜孢子，以及血清芽管试验阳性，是确认判断的重要依据。实际检验中应避免单凭菌落颜色或单项试验下结论，只有多项特征相互符合，结果判断才更可靠。