鱼肉中喹乙醇检测的固相萃取方法（Copure® HLB)
- 2019-08-01 10:33:54
- 逗点生物
一、样品提取
准确称取 5.00 g 匀浆鱼肉试样 ( 精确到 0.01 g) 于 50mL 具塞塑料离心管中，加入 35 mL 甲醇 / 水溶液 (5:95,v/v)，离心管置入摇床中，室温下恒温振荡器振荡速度110 r/min，避光振荡 45 min。提取液在 3500 r/min 下离心10 min，上清液经滤纸过滤，滤液加入10 mL正己烷，充分混匀后，以5000 r/min离心10 min，弃取上层溶液，下层溶液待净化。二、SPE 柱净化
实验材料： Copure® HLB，60 mg/3 mL
(1) 活化：HLB 固相萃取柱使用前依次使用 3 mL 甲醇和3 mL 水活化。(2) 上样和洗脱：将待净化液的样品清液加入已活化好的固相萃取柱中，以 1 mL/min 的流速过柱，弃去滤液。依次用 3 mL 0.02 mol/L 盐酸溶液、0.1 mol/L 盐酸溶液、甲醇/水溶液(5:95, v/v)淋洗固相萃取柱，弃去淋洗液，用吸耳球吹出小柱中残留液。用 5 mL 甲醇洗脱固相萃取柱，收集洗脱液。
(3)重新溶解：洗脱液于40 ℃氮吹吹干，用2 mL甲醇定容，
0.22 μm 微孔滤膜过滤，供 HPLC 上机测试。
三、仪器条件
设备：Waters Alliance 2695色谱柱：Welch Ultimate XB-C18 （4.6 mm×250 mm, 5 μm)
检测器：Waters 2487 紫外检测器
检测波长：380 nm
流动相：A：甲醇 B：0.1 mol/L 甲酸水溶液
洗脱方式：梯度洗脱，见表 1
表 1 梯度洗脱条件
流速：1.0 mL/min
进样体积：20 μL
四、实验结果
表 2 鱼肉基质中喹乙醇的 2.0 mg/kg 添加回收结果
图 1 添加水平为 2.0 mg/kg 鱼肉中喹乙醇检测色谱图
五、订购信息
