肺炎链球菌与甲型链球菌的区别

肺炎链球菌和甲型链球菌在血琼脂平板上都可表现为 α 溶血，即菌落周围出现草绿色溶血环，因此在传统检验中容易混淆。严格来说，肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae）是一种明确的细菌；而“甲型链球菌”通常指一类呈 α 溶血的链球菌，常包括草绿色链球菌群等，并不是单一菌种。二者在菌落形态、胆汁溶菌、菊糖发酵、奥普托欣敏感性等方面存在差异，可通过综合试验进行鉴别。

一、培养特性比较

肺炎链球菌在血琼脂平板上通常形成较小、湿润、半透明或灰白色菌落，周围有草绿色 α 溶血环。新鲜菌落可呈圆形、光滑、湿润状态；培养时间延长后，由于菌体自溶，菌落中央可能下陷，呈“脐窝状”或“棋子状”外观。部分有荚膜菌株菌落较黏液样，外观更湿润。

甲型链球菌也可在血琼脂上形成草绿色 α 溶血环，菌落多较小，灰白色或半透明，但通常不出现肺炎链球菌那样典型的中央凹陷和明显自溶现象。由于甲型链球菌包含多个种或菌群，菌落表现差异较大，不能单凭菌落大小和溶血形态作出可靠鉴别。

显微镜下，肺炎链球菌常呈革兰阳性、矛头状或柳叶状双球菌，成双排列较典型；甲型链球菌多呈链状或短链排列，也可呈双球样，因此显微形态只能作为辅助参考。

二、菊糖发酵试验

菊糖发酵试验是传统鉴别肺炎链球菌与部分甲型链球菌的方法之一。肺炎链球菌通常能发酵菊糖产酸，使培养基中的 pH 指示剂发生颜色变化；多数草绿色链球菌不能发酵菊糖或反应较弱。

试验中，分别挑取肺炎链球菌和疑似甲型链球菌菌落接种于菊糖发酵培养基，在适宜条件下培养后观察颜色变化。若指示剂由紫色变为黄色，通常提示产酸阳性；若颜色无明显变化，则为阴性。原文中“葡糖管”应修正为“菊糖管”。

需要注意的是，菊糖发酵试验属于传统生化鉴别方法，结果可能受菌株差异、培养基质量、接种量和培养时间影响。现代实验室更常将胆汁溶菌试验、奥普托欣敏感试验和自动化或质谱鉴定结合使用。

三、胆汁溶菌试验

胆汁溶菌试验是鉴别肺炎链球菌的重要经典试验。肺炎链球菌对胆汁或去氧胆酸钠敏感，胆盐可激活其自溶酶系统，使菌体裂解，培养液由混浊变清。多数甲型链球菌不被胆汁溶解，因此培养液仍保持混浊。

传统操作中，可将待检菌血清肉汤培养物分别加入胆盐或去氧胆酸钠溶液，同时设置生理盐水对照，置适宜温度反应后观察结果。若含胆盐管由混浊变清，而对照管仍混浊，可判为胆汁溶菌阳性；若加入胆盐后仍混浊，则为阴性。

胆汁溶菌阳性强烈支持肺炎链球菌鉴定，但仍应结合菌落形态、革兰染色和其他确认试验。若培养物过老、菌量不足或菌株自溶明显，可能影响观察。

四、奥普托欣敏感试验

奥普托欣敏感试验是目前区分肺炎链球菌和草绿色链球菌群的常用方法之一。肺炎链球菌通常对奥普托欣敏感，在含奥普托欣纸片周围形成明显抑菌圈；草绿色链球菌多数耐受奥普托欣，抑菌圈较小或无明显抑菌圈。

该试验操作相对简便，常与胆汁溶菌试验联合使用。若疑似菌表现为 α 溶血、奥普托欣敏感、胆汁溶菌阳性，则更符合肺炎链球菌特征；若 α 溶血、奥普托欣耐受、胆汁溶菌阴性，则更倾向于草绿色链球菌群。

不过，少数菌株可能出现非典型结果，因此重要样品或疑难结果应结合分子方法、MALDI-TOF MS 或其他确认手段。

五、主要鉴别点汇总

六、为什么不能只看 α 溶血

α 溶血是红细胞内血红蛋白被部分分解后形成的草绿色变化，肺炎链球菌和多种草绿色链球菌都可出现。因此，α 溶血只能提示“可能属于 α 溶血链球菌”，不能直接鉴定为肺炎链球菌。

在实际检验中，若只凭血琼脂上的草绿色溶血环判断，很容易把草绿色链球菌误判为肺炎链球菌，或将肺炎链球菌漏判。因此，应至少结合胆汁溶菌试验和奥普托欣敏感试验进行区分，必要时再进行更高等级的确认鉴定。

七、培养基和试验质量控制

血琼脂平板应新鲜、表面干燥适度、血液质量合格，否则会影响溶血环观察。血琼脂中血液种类、培养气体环境、培养时间和温度都会影响菌落大小及溶血表现。肺炎链球菌对培养条件较敏感，培养过久容易发生自溶，导致菌落形态和试验结果不稳定。

菊糖发酵管、胆汁溶菌试剂和奥普托欣纸片应在有效期内使用，并设置阳性和阴性对照。肺炎链球菌可作为胆汁溶菌和奥普托欣敏感阳性对照，典型草绿色链球菌可作为阴性或对照菌株。若对照结果异常，待检结果不应直接判读。

八、小结

肺炎链球菌和甲型链球菌均可在血琼脂上出现 α 溶血，单凭草绿色溶血环不能区分。肺炎链球菌通常表现为矛头状革兰阳性双球菌、血琼脂上小而湿润的 α 溶血菌落、菊糖发酵阳性、胆汁溶菌阳性、奥普托欣敏感；而草绿色链球菌群多为胆汁溶菌阴性、奥普托欣耐受，菊糖发酵多为阴性。实际鉴定应结合培养特性、显微形态、生化试验和必要的确认方法综合判断，避免仅凭单一培养现象作出结论。