奶制品中己烯雌酚检测的固相萃取方法（Copure® MAX）
- 2019-08-01 13:58:42
- 逗点生物
一、样品提取
取 5 mL 牛奶样品，置于离心管中，加入 10 mL 乙腈，涡旋混合 3 min，3500 r/min 离心 10 min，取上清液于离心管中，再向样品中加入 5 mL 乙腈，同前操作，合并提取液，50 ℃下氮吹至体积小于 0.1 mL，加水 10 mL，用 5 mol/LNaOH调节pH=11.0，9000 r/min 4 ℃下离心5 min，备用。二、SPE 柱净化
实验材料： Copure® MAX，60 mg/3 mL
(1) 活化：加入 2 mL 甲醇、2 mL 水活化。(2) 上样和洗脱：将样品上清液上柱，流速为 1 mL/min，依次用 1 mL 5 % 氨水溶液，0.5 mL 甲醇淋洗，弃去淋洗液，用 4 mL 甲酸 / 甲醇溶液 (1:19, v/v) 洗脱，流速为1 mL/min，收集洗脱液。
(3) 重新溶解：洗脱液于 40 ℃氮吹至吹干，加入 1 mL 流动相，涡旋30 s溶解。过0.22 µm滤膜后，用于HPLC测定。
三、仪器条件
设备：Waters Alliance 2695色谱柱：Welch Ultimate XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)
检测器：Waters 2487 紫外检测器
检测波长：245 nm
流动相：A：0.1 % 甲酸水 B：甲醇
洗脱方式：等度洗脱，A：B=30：70
流速：1.0 mL/min
进样体积：20 µL
柱温：室温
四、实验结果
表 1 牛奶中 0.2 mg/kg 加标回收实验结果
图 1 添加水平为 0.2 mg/kg 牛奶基质中乙烯雌酚检测色谱图
五、订购信息
