志贺氏菌检验中重要培养基的应用

志贺氏菌是引起细菌性痢疾的重要肠道致病菌，常通过污染的食物、水源或接触传播。由于志贺氏菌在样品中的数量可能较低，且常与大肠埃希氏菌、变形杆菌、柠檬酸杆菌、肠杆菌等肠道菌混杂存在，因此检验时通常需要结合增菌、选择性分离和后续确认试验。培养基的选择直接影响目标菌检出率和可疑菌落识别效率。

一、志贺氏菌增菌肉汤的作用

志贺氏菌增菌肉汤主要用于提高样品中志贺氏菌的检出机会。实际样品中，志贺氏菌可能数量少、受损伤或被大量伴随菌掩盖，直接分离时容易漏检。增菌培养基的作用是为目标菌提供适宜营养，同时通过一定选择性抑制部分杂菌，使志贺氏菌在分离前得到一定恢复和增殖。

需要注意的是，志贺氏菌对选择性抑制剂相对敏感，增菌体系选择性过强可能反而抑制目标菌。因此，志贺氏菌检验不宜单纯追求高抑菌性，而应在“促进目标菌恢复”和“控制背景菌干扰”之间取得平衡。对于污染程度较高的样品，增菌后再接种选择性平板，有助于提高可疑菌落的发现率。

二、麦康凯琼脂：弱选择性分离培养基

麦康凯琼脂是肠道菌分离中常用的弱选择性鉴别培养基。其选择性主要来自胆盐和结晶紫，可抑制多数革兰氏阳性菌；其鉴别性来自乳糖和中性红，可区分乳糖发酵菌与非乳糖发酵菌。

志贺氏菌多数不发酵乳糖，因此在麦康凯琼脂上通常形成无色至淡色、半透明、湿润、光滑、边缘整齐的圆形菌落。典型菌落一般较小，外观与部分非乳糖发酵肠杆菌相似。变形杆菌、部分沙门菌、部分不发酵乳糖的大肠埃希氏菌或其他肠杆菌也可能形成类似无色菌落，因此麦康凯琼脂上的“无色菌落”只能作为可疑菌落，不能直接判定为志贺氏菌。

麦康凯琼脂的优势是抑制性较温和，对受损伤的志贺氏菌相对友好，适合杂菌污染不严重或需要提高恢复率的样品。其不足是选择性有限，可疑菌落较多，后续需要结合生化鉴定、血清学或分子方法确认。

三、XLD 琼脂：常用选择性鉴别培养基

XLD 琼脂即木糖赖氨酸去氧胆酸盐琼脂，是志贺氏菌和沙门氏菌分离中常用的选择性鉴别培养基。培养基中的去氧胆酸钠为选择性抑制剂，可抑制部分革兰氏阳性菌和部分伴随菌；木糖、乳糖、蔗糖、赖氨酸、硫代硫酸钠、柠檬酸铁铵和酚红共同构成鉴别体系。

在 XLD 琼脂上，志贺氏菌通常不发酵木糖、乳糖和蔗糖，或发酵能力弱，因此菌落多呈红色、粉红色至无色半透明，通常不产生黑心。沙门氏菌因多数可产生硫化氢，常表现为红色菌落伴黑色中心；而许多大肠菌群因发酵糖产酸，可形成黄色菌落。通过这些颜色和黑心特征，可对志贺氏菌、沙门氏菌及部分伴随菌进行初步区分。

XLD 琼脂的选择性和鉴别性强于麦康凯琼脂，适合从肠道样品、食品样品及环境样品中筛选可疑志贺氏菌。但其结果仍需谨慎解释：部分变形杆菌、不典型大肠菌群或其他肠杆菌可能形成相似菌落；部分志贺氏菌菌株在不同培养条件下也可能表现不典型。因此，XLD 琼脂应作为筛选培养基，而不是最终鉴定依据。

四、志贺氏菌显色培养基：提高筛查效率

志贺氏菌显色培养基通常利用酶底物反应区分目标菌和非目标菌。其基本思路是让常见非志贺氏菌通过特定酶反应形成有色菌落，而志贺氏菌因相关反应不活跃或缺乏相应酶活性，形成白色、浅粉色或接近培养基底色的可疑菌落，从而提高筛查效率。

显色培养基的优势是菌落更容易识别，特别适合样品量较大、背景菌较复杂的初筛工作。相比传统选择性平板，显色培养基通常能减少部分干扰菌，提高挑取可疑菌落的效率。

但显色培养基也有局限。志贺氏菌本身生化反应相对不活跃，其“阴性显色”或“弱显色”特征容易受到培养时间、菌株差异和背景菌影响。变形杆菌等非目标菌仍可能造成干扰，部分非典型菌株也可能出现假阴性或假阳性。因此，显色培养基适合作为快速筛查工具，不能替代后续确认试验。

五、几类培养基的应用比较

六、结果判断与注意事项

志贺氏菌检验中，培养基结果应坚持“可疑筛选、进一步确认”的原则。麦康凯琼脂上的无色菌落、XLD 琼脂上的红色或半透明无黑心菌落、显色培养基上的浅色可疑菌落，都只能提示可能存在志贺氏菌，不能直接作为最终结论。

实际检测时，建议同时使用不同选择强度和鉴别原理的培养基。例如，麦康凯琼脂有利于恢复受损菌，XLD 琼脂有利于提高鉴别能力，显色培养基有利于提高筛查效率。多种培养基互补使用，可降低漏检和误判风险。

此外，样品基质也会影响判断。粪便、肉制品、乳制品、水样和环境样品中的背景菌组成不同，培养基上的菌落表现也可能不同。检验人员应结合样品来源、增菌表现、平板菌落特征和后续确认结果综合分析。

七、小结

志贺氏菌检验的关键不在于单一培养基，而在于合理组合。增菌肉汤用于提高目标菌恢复和检出机会；麦康凯琼脂适合温和分离；XLD 琼脂适合选择性筛查和初步鉴别；显色培养基适合提高大批量样品的识别效率。由于志贺氏菌与多种肠道菌菌落形态相近，任何一种培养基上的典型表现都不能单独作为最终判定依据，必须结合标准确认试验完成鉴定。