猪肉中激素检测的固相萃取方法（Copure® HLB）
- 2019-08-01 16:49:57
- 逗点生物
一、样品提取
准确称取均质后的猪肉 5.0 g 于 50 mL 离心管中加入水 20mL，甲醇 5 mL，涡旋 1 min，4500 r/min 离心 5 min，取上清液，备用。二、SPE 柱净化
实验材料： Copure® HLB，60 mg/3 mL
(1) 活化：HLB 固相萃取柱使用前用 3 mL 甲醇、3 mL 水活化。(2) 上样和洗脱：往固相萃取柱中加入提取备用液，弃去流出液；加入 3 mL 35 % 甲醇水溶液淋洗，弃去淋洗液，抽干小柱；加 6 mL 甲醇洗脱，收集洗脱液（整个上样、洗脱过程保持流速 1 mL/min）。
(3) 重新溶解：40 ℃缓慢氮气流条件下吹至近干，用 1 mL甲醇溶解，经 0.22 μm 滤膜重新过滤，供 HPLC 测定。
三、仪器条件
设备：Waters Alliance 2695色谱柱：Welch Ultimate XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)
检测器：Waters 2487 紫外检测器
检测波长：230 nm
流动相：A：乙腈 B：水
洗脱方式：梯度洗脱
表 1 梯度洗脱条件
流速：1.0 mL/min
进样体积：20 μL
四、实验结果
表 2 1.0 mg/kg 猪肉中激素的添加回收结果
图 1 添加水平为 1.0 mg/kg 猪肉中激素检测的液相色谱图
五、订购信息
