念珠菌显色培养基：用于念珠菌分离、检测和初步鉴别的药典培养基

二、培养基检验原理

念珠菌显色培养基由营养系统、选择性抑菌系统和显色系统组成。

胨和葡萄糖为念珠菌提供氮源、碳源及生长所需营养物质；琼脂使培养基形成稳定固体平板，便于菌落分离和颜色观察；氯霉素用于抑制部分细菌生长，减少细菌污染对念珠菌检测的干扰。

培养基中的显色底物是判断结果的关键。不同念珠菌可产生不同类型或不同活性的水解酶，这些酶作用于显色底物后释放显色基团，使菌落呈现绿色、蓝色、粉色或紫粉色等特征颜色。由于不同菌株之间可能存在酶活性差异，显色强弱和颜色深浅会受培养时间、接种量、培养温度、培养基状态等因素影响，因此结果判读应结合标准培养条件进行。

三、配方组成、用量及作用

说明：原配方中“色素”更准确的理解应为显色底物或显色系统。显色培养基并不是简单依靠外加色素染色，而是通过目标菌酶解显色底物后产生颜色反应。

四、用途与适用场景

该培养基适用于念珠菌的快速筛查和初步区分，尤其适合需要提高判读效率的微生物检验场景。但对于异常颜色、弱显色、混合菌落或关键质量判定样品，应结合进一步鉴定方法确认。

五、使用方法

称取本品47.7 g，加入1 L蒸馏水或去离子水中，搅拌混匀后加热煮沸，使培养基完全溶解。溶解后冷却至适宜温度，倾注无菌平板，待凝固后备用。

本培养基含有显色底物和选择性抑菌成分，制备时应注意避免长时间加热。不得高压灭菌，也不宜反复融化或过度煮沸，否则可能导致显色系统受损、背景颜色异常、菌落显色减弱或选择性下降。

制备好的平板应避光保存，并尽快使用。使用前应检查平板是否存在干裂、析水、污染、颜色明显异常或凝胶状态异常等问题。

六、质量控制要求

质控菌株接种后，于30 ℃～35 ℃培养24 h～72 h，观察生长情况、选择性和特征性颜色反应。

其中，PR用于评价培养基对目标菌的促生长能力；G值用于评价培养基对非目标菌的抑制能力。对于念珠菌显色培养基而言，既要保证白色念珠菌等目标菌生长良好，也要保证典型菌株能够呈现符合要求的颜色反应，同时对大肠埃希氏菌等非目标细菌具有足够抑制作用。

七、结果判读与注意事项

培养后应在规定时间内观察菌落颜色和生长状态。白色念珠菌通常呈绿色菌落，热带念珠菌呈蓝色菌落，光滑念珠菌呈粉色菌落，克柔念珠菌呈紫粉色菌落。不同厂家原料、培养时间、菌株状态和接种浓度可能影响颜色深浅，因此判读时应以标准质控结果为基础。

使用该培养基时应重点注意以下几点：

第一，显色结果是初筛依据，不应单独作为最终鉴定结论。对于关键样品或疑似异常结果，应进一步确认。

第二，培养基不应高压灭菌。显色底物和氯霉素等成分对高温处理较敏感，过度加热可能导致显色异常或选择性下降。

第三，培养基应避光、低温、干燥保存。显色系统对光照、温度和湿度较敏感，保存不当可能影响培养基外观、显色能力和质控结果。

第四，结果观察应覆盖24 h～72 h。过早观察可能出现显色不足，过长培养则可能出现颜色加深、扩散或背景干扰，因此应结合药典规定和企业内控标准进行判读。

八、总结

念珠菌显色培养基通过营养支持、选择性抑菌和酶底物显色反应，实现念珠菌的分离、检测和初步鉴别。其优势在于操作简便、结果直观、判读效率高，适用于药品微生物检验及相关质量控制场景。

在实际使用中，应严格控制配制条件，避免高压灭菌和过度加热；同时通过白色念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌和大肠埃希氏菌等质控菌株验证培养基的促生长能力、显色特异性和选择性，确保检测结果稳定可靠。

参考文献：《中华人民共和国药典》2025年版。