茶叶中合成着色剂检测的固相萃取方法（Copure® PA）
- 2019-08-05 16:36:47
- 逗点生物
一、样品提取
准确称取2.0 g红茶置于50 mL离心管中，加入20 mL水，振荡提取30 min，4000 r/min离心5 min，上层清液备用。二、SPE 柱净化
实验材料：Copure® PA，500 mg/6 mL
(1)活化：聚酰胺柱使用前用5 mL甲醇活化，5 mL水平衡。(2) 上样和洗脱：取 5 mL 备用液过柱，弃去流出液；用3 mL 水淋洗，再用足量甲醇 / 甲酸溶液 (6:4, v/v) 淋洗至流出液透明，弃去流出液，抽干小柱；用 5 mL 5 %氨水甲醇洗脱，收集洗脱液。（整个上样、洗脱过程控制流速在 1 mL/min 内）。
(3) 上机测试：将洗脱液定容至 5 mL，取 1 mL 经 0.22 μm水系滤膜过滤，供上机测试。注：建议使用 PTFE 亲水材质滤膜过滤，避免其他材质滤膜对色素有吸附造成回收率偏低现象。
三、仪器条件
设备：Waters Alliance 2695色谱柱：InertSustain-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)
检测器：Waters 2996 紫外检测器
检测波长：254 nm
流动相：A：甲醇 B：0.02 mol/L 乙酸铵缓冲溶液
洗脱方式：梯度洗脱，见表 1
表 1 梯度洗脱条件
流速：1.0 mL/min
进样体积：20 μL
四、实验结果
表 2 10.0 mg/kg 茶叶中合成着色剂的添加回收结果
图 1 添加水平为 10.0 mg/kg 茶叶中合成着色剂检测的液相色谱图
五、订购信息
