火腿中胭脂红和诱惑红检测的固相萃取方法（Copure® PA）
- 2019-08-06 10:38:42
- 逗点生物
一、样品提取
准确称取粉碎好的火腿 10.0 g 于 50 mL 离心管中，加入30 mL 氨化乙醇溶液（氨水：乙醇：水 =20:70:10），涡旋1 min，4000 r/min 离心 5 min，上清液转移至 100 mL 鸡心瓶中，50 ℃旋蒸至 2 mL 左右（注意容易暴沸），转移至 15 mL 离心管中，加入水至 10 mL。样品溶液待净化。二、SPE 柱净化
实验材料：Copure® PA，500 mg/6 mL
(1) 活化：聚酰胺小柱使用前用 6 mL 甲醇、6 mL 水活化。(2) 上样和洗脱：在聚酰胺小柱上加入 10 mL 待净化样品，控制流速在 1-2 滴 / 秒，弃去流出液。依次用 6 mL 甲醇、6 mL 水淋洗，弃去流出液，抽干。然后用 6 mL 8 % 氨化甲醇进行洗脱，控制流速在 1-2 滴 / 秒，收集洗脱液。
(3)重新溶解：洗脱液于45 ℃氮吹至干，加1 mL水定容，混匀，过 0.45 μm 水系滤膜，待上机测试。
注：建议使用 PTFE 亲水材质滤膜过滤，避免其他材质滤膜对色素有吸附造成回收率偏低现象。
三、仪器条件
设 备：Waters Alliance 2695色谱柱：Welch Ultimate XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)
检测器：Waters 2487 紫外检测器
检测波长：254 nm
流动相：A：甲醇 B：0.02 mol/L 乙酸铵缓冲溶液
洗脱方式：梯度洗脱
表 1 梯度洗脱条件
流速：1.0 mL/min
进样体积：20 μL
四、实验结果
表 1 0.2 mg/kg 火腿中胭脂红和诱惑红的添加回收结果
图 1 添加水平为 0.2 mg/kg 火腿中胭脂红和诱惑红检测的液相色谱图
五、订购信息
