牛奶中三聚氰胺检测的固相萃取方法（Copure® MCX）
- 2019-08-06 13:19:28
- 逗点生物
一、样品提取
称取 2.0 ｇ牛奶 ( 精确至 0.01 g) 于 50 mL 离心管中，加入 15 mL 1 % 三氯乙酸溶液和 5 mL 乙腈，超声提取 10min，再振荡提取 10 min，4000 r/min 离心 10 min。上清液经三氯乙酸溶液润湿的滤纸过滤后，用三氯乙酸溶液定容至 25 mL，移取 5 mL 滤液，加入 5 mL 水混匀后做待净化液。二、SPE 柱净化
实验材料：Copure® MCX，60 mg/3 mL
(1) 活化：使用前依次用 3 mL 甲醇、5 mL 水活化柱子。(2) 上样和洗脱：将待净化液转移至固相萃取柱中。依次用 3 mL 水、3 mL 甲醇洗涤，抽至近干后，用 6 mL5 % 氨化甲醇溶液洗脱。整个固相萃取过程流速不超过1 mL/min。
(3) 重新溶解：洗脱液于 50 ℃下用氮气吹干，残留物用
1 mL 流动相定容，涡旋混合 1 min，过微孔滤膜后，供
HPLC 测定。
三、仪器条件
设备：Waters Alliance 2695色谱柱：Welch Ultimate XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)
检测器：Waters 2487 紫外检测器
检测波长：240 nm
流动相：A：离子对试剂缓冲液 ( 准确称取 2.10 g 柠檬酸
和 2.16 g 辛烷磺酸钠，加入约 980 mL 水溶解，调节 PH 至
3.0 后，定溶至 1 L 备用 ) B：乙腈。
洗脱方式：等度洗脱，A: B=80: 20
柱温：室温
进样体积：20 µL
流速：1 mL/min
四、实验结果
表 1 2.5 mg/kg 牛奶基质中三聚氰胺的添加回收结果
表 2 W 品牌 MCX 柱，2.5 mg/kg 牛奶基质中三聚氰胺的添
加回收结果
图 1 添加水平为 2.5 mg/kg 牛奶中三聚氰胺的液相
色谱图
五、订购信息
