果蔬汁中脱氢乙酸检测的固相萃取方法（Copure® C18）
- 2019-08-07 17:10:50
- 逗点生物
一、样品提取
准确称取样品 5.0 g 于 50 mL 离心管中，加入 10 mL 水，用20 g/L NaOH溶液调节pH=7～8，加水稀释至刻度，摇匀，4000 r/min 离心 8 min；取上清液 20 mL 用 10 % 甲酸水溶液调节 pH=4 ～ 6，定容至 25 mL，取 5 mL 溶液待净化。二、SPE 柱净化
实验材料：Copure® C18，500 mg/6 mL
(1)活化：C18固相萃取柱使用前用5 mL甲醇、5 mL水活化。(2) 上样和洗脱：将待净化样品转移至固相萃取柱中，弃去流出液；用 5 mL 水淋洗，弃去淋洗液，抽干小柱；加入8 mL 甲醇洗脱，收集洗脱液（上样、洗脱过程控制流速在1 mL/min 内）。
(3) 重新定容：40 ℃缓慢氮气流条件下吹至近干，用水定容至 2 mL，0.22 μm 滤膜过滤，供 HPLC 分析。
三、仪器条件
设备：Waters Alliance 2695色谱柱：Welch Ultimate XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)
检测器：Waters 2487 紫外检测器
检测波长：293 nm
流动相：A：甲醇 B：20 mmol/L 乙酸铵缓冲溶液
洗脱方式：等度洗脱，A: B=10: 90
流速：1.0 mL/min
进样体积：20 μL
四、实验结果
表 1 5.0 mg/kg 黄瓜汁基质中脱氢乙酸的添加回收结果
图 1 添加水平为 5.0 mg/kg 黄瓜汁基质中脱氢乙酸检测的液相色谱图
五、订购信息
