银耳中米酵菌酸检测的固相萃取方法（Copure® MAX）
- 2019-08-09 16:31:26
- 逗点生物
一、样品提取
干试样经粉碎过后称取 20.00 g（精确至 0.01 g）置于锥形瓶中，加 100 mL 甲醇 / 氨水 / 水溶液 (80:1:19,v/v/v)；鲜（湿）样试经剪碎、匀浆后称取 10.0 g（精确至 0.01 g），加入 80 mL 甲醇 / 氨水 / 水溶液溶液(80:1:19, v/v/v)；混匀，室温下避光浸泡 1 h，超声提取 30 min，过滤；干试样滤液取 50 mL，鲜（湿）试样取滤液 40 mL，置 80 ℃水浴中（加入沸石）浓缩至约3 min，待净化。二、SPE 柱净化
实验材料：Copure® MAX，60 mg/3 mL
(1) 活化：MAX 固相萃取柱使用前依次用 5 mL 甲醇、5 mL水活化。(2) 上样和洗脱：在 MAX 固相萃取柱上加入待净化样品，弃去流出液；用 5 mL 水、5 mL 甲醇淋洗，弃去淋洗液，抽干小柱；用6 mL 2 %甲酸甲醇溶液洗脱，收集洗脱液（上样、洗脱过程控制流速在 1 mL/min 以内）。
(3)重新溶解：洗脱液于40 ℃缓慢氮气流条件下吹至近干，用 1 mL 甲醇溶液溶解，经 0.22 μm 滤膜过滤，供高效液相色谱测定。
三、仪器条件
设备：Waters Alliance 2695色谱柱：Welch Ultimate XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)
检测器 ：Waters 2487 紫外检测器
检测波长：267 nm
流动相：A：水（乙酸调 pH=2.5） B：甲醇
洗脱方式：等度洗脱，A：B=22：78
流速：1.0 mL/min
进样体积：20 μL
四、实验结果
表 1 1.0 mg/kg 银耳中米酵菌酸的添加回收结果
图 1 添加水平为 1.0 mg/kg 银耳中米酵菌酸检测的液相色谱图
五、订购信息
