司马蕙兰改良 Campy-BAP 培养基：原理、配方及应用

司马蕙兰改良 Campy-BAP 培养基是一类用于空肠弯曲菌（Campylobacter jejuni）选择性分离培养的含血琼脂培养基。其基本思路是在营养丰富的固体基础培养基中加入血液及多种选择性抗微生物成分，一方面满足弯曲菌对营养和培养环境较高的要求，另一方面抑制样品中大量伴生细菌和真菌，从而提高目标菌的分离效率。

弯曲菌属于营养要求较高的微需氧微生物，对培养环境中的氧化应激较为敏感。因此，传统弯曲菌培养基通常通过加入血液、活性炭或亚硫酸盐等成分，降低活性氧及氧化性代谢产物对菌体的损伤。血液不仅提供血红素及其他生长相关因子，同时还能在一定程度上改善培养基的氧化还原环境。

培养基的选择性原理

司马蕙兰改良 Campy-BAP 培养基采用“营养促进 + 氧化保护 + 多重选择性抑制”的设计。

蛋白胨、胰蛋白胨和酵母浸出粉提供氨基酸、小肽、含氮化合物、维生素及其他生长因子；少量葡萄糖提供可利用碳源，氯化钠维持适宜的渗透压。亚硫酸氢钠具有一定还原作用，有助于降低培养基中的氧化压力，而脱纤维羊血进一步提供生长因子并改善弯曲菌的生长环境。

培养基的选择性主要来自多种抗微生物成分的协同作用。万古霉素主要抑制革兰阳性伴生菌；多黏菌素B对多种革兰阴性细菌具有抑制作用，而弯曲菌对该浓度具有相对耐受性；甲氧苄啶（Trimethoprim，TMP）进一步抑制部分肠道伴生菌。Skirrow 类弯曲菌培养基正是利用弯曲菌对 TMP 的较高耐受性，以及对万古霉素和多黏菌素B的相对耐受性建立选择性。

在此基础上，改良 Campy-BAP 中加入**头孢噻吩（Cephalothin）**进一步扩大对伴生细菌的抑制范围，两性霉素B则用于抑制酵母和霉菌。因此，这种多重选择体系尤其适合背景菌较复杂样品中空肠弯曲菌的分离。经典 Campy-BAP 培养基也采用万古霉素、多黏菌素B、TMP、头孢噻吩和两性霉素B组成的选择体系。

司马蕙兰改良 Campy-BAP 培养基配方

以下为每 1000 mL 培养基的典型组成：

其中多黏菌素B 2.5 U/mL、TMP 5 μg/mL和万古霉素10 μg/mL，与经典 Skirrow 选择体系常见的终浓度相一致。

培养基的制备与培养要点

制备时先将基础培养基各成分加入水中充分溶解并完成基础培养基灭菌。灭菌后的培养基冷却至适合加入血液和抗生素的温度后，在无菌条件下加入脱纤维羊血及已经无菌处理的选择性添加剂，充分但轻柔混匀后倾注平板。血液及多数抗生素不宜随基础培养基一起进行高温高压灭菌，以避免血液成分受到明显热破坏或抗生素活性下降。类似的 Skirrow 培养基制备工艺也是基础培养基灭菌后冷却，再无菌加入血液和选择性添加剂。

培养时应特别注意微需氧条件。对于空肠弯曲菌等嗜热型弯曲菌，通常采用约 40～44 ℃、微需氧条件培养约 36～48 h。商品化 Skirrow 弯曲菌选择培养基的性能评价同样采用40～44 ℃、36～48 h微需氧培养条件。 实际检测时，培养温度、时间和气体组成仍应按照所采用的检测标准或方法执行。

用途及使用注意事项

司马蕙兰改良 Campy-BAP 培养基主要用于空肠弯曲菌的选择性分离培养。与普通血琼脂相比，其优势在于通过多种抗菌成分降低复杂样品中背景菌的干扰，使弯曲菌菌落更容易被识别和进一步鉴定。

需要注意的是，选择性越强并不意味着对所有弯曲菌种的回收率越高。不同 Campylobacter 种甚至不同菌株对头孢菌素、多黏菌素等选择剂的敏感性存在差异，一些弯曲菌可能受到较强选择性培养基的抑制。因此，该配方更适合作为空肠弯曲菌等目标菌的选择性培养基，而不宜简单视为能够高效回收所有弯曲菌的通用培养基。弯曲菌培养基的发展过程中，也不断通过调整抗生素种类和浓度，以减少对 C. upsaliensis、部分 C. coli、C. lari 等较敏感菌株的抑制。

此外，配方中的羊血应使用脱纤维血，以避免凝血影响培养基均一性和菌落观察。制备过程中还应避免血液和选择性添加剂长时间处于较高温度，并注意充分但不过度搅拌，以获得均匀、稳定的血琼脂平板。

总体而言，司马蕙兰改良 Campy-BAP 培养基通过丰富营养、血液保护作用以及多种选择性抗微生物成分的组合，为空肠弯曲菌提供了较有利的生长环境，同时有效降低复杂菌群的干扰，是传统弯曲菌选择性分离培养基的一种改良形式。