牛奶中黄曲霉毒素 M1 检测的免疫亲和柱法 （Copure® 黄曲霉毒素 M1 免疫亲和柱）
- 2019-08-13 13:58:59
- 逗点生物
一、样品提取
称取 4.0 g 牛奶样品，加 10 mL 甲醇涡旋 10 分钟，4℃下6000 转冷冻离心 10 分钟，取 2 mL 提取液加 40 mL PBS溶液稀释待净化。二、免疫亲和柱净化
实验材料：Copure® 黄曲霉毒素 M1 免疫亲和柱，1 mL
(1) 上样：将 20 mL 上样器连接于免疫亲和柱上端，取待净化液以 1-2 滴 / 秒的速度通过免疫亲和柱，弃掉流出的液体。(2) 淋洗和洗脱：加 10 mL 水淋洗柱子，弃掉流出的液体；抽干小柱；加入 4 mL 乙腈分两次缓慢洗脱，流速约为 2-3秒 / 滴。
(3) 重新溶解：在 40 ℃下氮吹至近干，加初始流动相定容至 1 mL，过 0.22 μm 滤膜，待上机测试。
三、仪器条件
设备：岛津 HPLC-30 A色谱柱：Inertsil ODS-3 (2.1 mm×75 mm, 3 μm)
检测器：RF-20A 荧光检测器
检测波长：激发波长：435 nm 发射波长：365 nm
流动相：A：乙腈 B：水
洗脱方式：等度洗脱，A：B=25：75
流速：0.3 mL/min
进样体积：1 μL
四、实验结果
表 1 1.0 μg/kg 牛奶中黄曲霉毒素 M1 的添加回结果
图 1 添加水平为 1.0 μg/kg 牛奶中黄曲霉毒素 M1 检测的液相色谱图
五、订购信息
