猪肉中玉米赤霉烯酮检测的固相萃取方法（Copure® HLB）
- 2019-08-13 17:14:41
- 逗点生物
一、样品提取
准确称取均质后的猪肉试样 5.00 g 试样（精确至 0.01 g）于 50 mL 离心管中加入 10 mL 0.05 M 乙酸钠缓冲液和 25μl β- 葡萄糖 / 硫酸脂复合酶，混匀，于 37℃水浴中放置 12 h。水解后加入 10 mL 乙腈，并加入 200 μL 1 M 的NaOH 溶液，振荡 30 min，4000 r/min 离心 3 min，移取上清液 10 mL，用 30 mL pH=7.4 的 PBS 溶液稀释，混匀，用滤纸过滤，收集于 50 mL 的离心管中备用。二、SPE 柱净化
实验材料：Copure® HLB，150 mg/6 mL
(1) 活化：净化前用 5 mL 甲醇活化，5 mL 的水平衡。(2) 上样和洗脱：取 10 mL 进行上样，将提取液以 2 mL/min 的速度过柱，弃去滤液，依次用 5 mL 水，5 mL 甲醇淋洗，弃去淋洗液，将小柱抽干，再用 10 mL 甲醇洗脱并收集洗脱液。
(3) 重新溶解：40 ℃缓慢氮吹至近干，加 1 mL 乙腈溶解。涡旋混合 1 min，过 0.22 μm 有机滤膜，待上机测试。
三、仪器条件
仪器：Waters Alliance 2695色谱柱：InerSustain®-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)
检测器：Waters 2475 荧光检测器
检测波长：激发波长：274 nm 发射波长：440 nm
流动相：A：乙腈 B：水 C：甲醇
洗脱方式：等度洗脱，A：B：C=46：46：8
流速：1 mL/min
进样体积：20 μL
四、实验结果
表 1 0.24 mg/kg 猪肉基质中玉米赤霉烯酮的添加回收结果
图 1 添加水平为 0.24 mg/kg 猪肉基质中玉米赤霉烯酮的添加回收结果
五、订购信息
