苹果制品中展青霉素含量检测的多功能净化柱法 (Copure® 228 多功能净化柱 )
- 2019-08-21 13:38:30
- 逗点生物
一、样品提取
1、苹果肉固体样品处理准确称取 1.0 g 样品于 50 mL 离心管中，加入 10 mL 水与150 uL 果胶酶溶液，涡旋混匀 1 min，室温下避光放置过夜后，加入 10 mL 乙酸乙酯，涡旋混匀 5 min，在 5000 r/min 下离心 5 min，取上层乙酸乙酯层于 50 mL 离心管中；再用 8 mL 乙酸乙酯提取一次，合并两次乙酸乙酯提取液，氮吹至干；以 2.0 mL 乙酸溶液 (10 mL 乙酸加入 250 mL 超纯水配制)溶解残留物，再加入8.0 mL乙腈，混匀后待净化。
2、苹果汁液体样品处理
准确称取 4.0 g 果汁置于 50 mL 离心管中，加入 21 mL 乙腈溶液，于涡旋器中涡旋混匀 10 min，在 5000 r/min 下离心 10 min，取上清液作为样品提取液。
二、样品净化
实验材料：Copure® 228 多功能净化柱
(1) 向试管中加入 10 mL 样品提取液，然后加入 50 uL乙酸；(2) 将 228 净化柱橡胶头从试管顶端插入试管中，并向下压净化柱至试管底端；
(3) 将净化柱上部净化后的样品提取液倒出至样品瓶或者EP 管中；
(4) 取 5 mL 净化提取液，加入 20 uL 乙酸，氮吹至干，用1 mL乙酸水溶液(10 mL乙酸加入250 mL超纯水配制)复溶，经滤膜过滤供上机测试。
三、仪器条件
仪器：Waters Alliance 2695色谱柱：InertSustain-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)
检测器：Waters 2996 DAD 检测器
检测波长：276 nm
流动相：A：水 B：乙腈
洗脱方式：梯度洗脱，见表 1
表 1 梯度洗脱条件
流速：1.0 mL/min
进样体积：20 μL
四、实验结果
表 1 20 μg/kg 苹果汁中展青霉素的添加回收结果
图 1 添加水平为 20 μg/kg 展青霉素检测的液相色谱图
五、订购信息
