食品中4-甲基咪唑的固相萃取法（Copure® MCX）
- 2022-08-15 13:50:31
- 逗点生物
食品中4-甲基咪唑的固相萃取法（Copure® MCX）
《GB 5009.282-2020 食品安全国家标准 食品中1-甲基咪唑、2-甲基咪唑及4-甲基咪唑的测定》
一、样品提取
准确称取均匀的样品2.0 g（精确至0.001 g）于50 mL离心管中，加入2 %甲酸水溶液至20 mL，混匀，10000 r/min离心5 min，上清液待净化。
二、样品净化（Copure®MCX，200mg/6mL）
活化：依次用5 mL甲醇，5 mL水活化固相萃取小柱。
上样：取待净化样品10 mL过柱，弃掉流出的液体。
淋洗和洗脱：分别加入2 mL 2 %甲酸水、5 mL水、5 mL甲醇淋洗固相萃取小柱，弃去流出的液体；加入8 mL 5 %氨水甲醇洗脱固相萃取小柱，收集洗脱液。
重新溶解：45 ℃下氮吹至近干，加入乙腈-5 mmol/L乙酸铵（9+1）溶液1 mL复溶，涡旋30s，过0.22μm有机系滤膜，上机测试。
三、标准曲线溶液的制备
取适量标液，用乙腈-5 mmol/L乙酸铵（9+1）溶液稀释成浓度分别为10 μg/L、20 μg/L、50 μg/L、100 μg/L、200 μg/L、400 μg/L的标准上机溶液。
四、仪器条件
（1）色谱条件
仪器：UPLC-MS/MS（Thermo Fisher TSQ Endura）
色谱柱：GOWON HILIC (2.1 mm×100 mm，2.7 μm)
流动相：A：5 mmol/L乙酸铵 B：乙腈
洗脱方式：梯度洗脱，见表1
流速：0.6 mL/min
柱温：35℃
进样量：5 μL
表1 梯度洗脱程序
时间/min |
A/% |
B/% |
0.00 |
5 |
95 |
3.00 |
5 |
95 |
3.50 |
40 |
60 |
4.50 |
40 |
60 |
5.00 |
5 |
95 |
6.00 |
5 |
95 |
（2）质谱条件
离子源：HESI
电喷雾电压：3500 V
鞘气压力：35 arb
辅气压力：5 arb
离子传输管：380 ℃
辅气温度：350 ℃
表2 组分名称、保留时间及特征离子一览表（*为定量离子）
名称 |
保留时间/min |
母离子 |
子离子 |
4-甲基咪唑 |
2.24 |
83.1 |
42.1、56.2* |
五、实验结果
表3 4-甲基咪唑加标回收实验结果
基质 |
10.0 μg/kg |
50.0 μg/kg |
100.0 μg/kg |
||||
回收率 （%） |
RSD（%） n=3 |
回收率 （%） |
RSD（%） n=3 |
回收率 （%） |
RSD（%） n=3 |
||
百香果汁 |
91.6 |
6.95 |
102 |
4.02 |
93.4 |
4.21 |
|
蜂蜜 |
104 |
4.41 |
92.2 |
4.23 |
88.9 |
2.25 |
|
图1 百香果汁中添加水平为100.0 μg/kg时4-甲基咪唑的离子流图
图2 蜂蜜中添加水平为100.0 μg/kg时4-甲基咪唑的离子流图
六、订购信息
货号 |
描述 |
包装 |
COMCX6200 |
Copure®MCX6200净化柱，200mg/6mL |
50支/盒 |
SDC-3000 |
biocomma®多管涡旋混匀仪 |
1台/箱 |
BN24 |
biocomma®智能水浴氮吹 |
1台/箱 |
SF130-22-PTFE |
PTFE针式过滤器，直径13 mm，孔径0.22 μm，有机系 |
100个/盒 |
SC2-1 |
2 mL蓝色聚丙烯盖，白色PTFE/红色硅胶垫，9-425 |
100个/盒 |
V2-AL |
2 mL螺纹棕色样品瓶，带书写处11.6*32 mm，9-425 |
100个/盒 |
