食品中丙酸检测的固相萃取方法（Copure® HLB）
- 2022-08-15 13:50:31
- 逗点生物
食品中丙酸检测的固相萃取方法（Copure® HLB）
《GB 5009.120-2016食品中丙酸钠、丙酸钙的测定》
一、样品提取
称取5.0 g样品于50 mL离心管中，加水20 mL，加入0.5 mL的1.0 mol/L磷酸溶液，涡旋混匀2 min,超声提取10 min,用1.0 mol/L磷酸溶液调pH为2.8~3.1，用水定容至刻度，摇匀，8000 r/min离心5 min，离心后取上清液5 mL于另一干净试管，待净化。
二、样品净化 （Copure® HLB, 500 mg/6mL）
活化：固相萃取柱使用前依次用5 mL甲醇，5 mL 水活化。
上样：加入上述待净化液至固相萃取柱中。
淋洗：加入5 mL 10 %甲醇水淋洗固相萃取柱，弃去流出液。
洗脱：加入5 mL 50 %甲醇水溶液洗脱，收集洗脱液，混匀，过0.22 μm有机滤膜，上机。
二、仪器条件
仪器：液相色谱仪，ThermoFisher U3000
色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C18 (4.6 mm×250 mm，5 μm)
流动相：A：1.5 g/磷酸氢二铵溶液（用1.0 mol/L磷酸溶液调为3.0左右）
B：50 %甲醇水溶液
洗脱方式：梯度洗脱，见表1
流速：1.0 mL/min
柱温：25 ℃
进样量：20 μL
检测器：紫外检测器
检测波长：214 nm
表1 梯度洗脱程序
时间/min |
A/% |
B/% |
0.0 |
95 |
5 |
14.0 |
95 |
5 |
18.0 |
5 |
95 |
21.0 |
5 |
95 |
22.0 |
95 |
5 |
30.0 |
95 |
5 |
三、实验结果
（1）加标回收实验结果
表2 加标回收结果
名称 |
加标浓度 （g/kg） |
回收率（%） |
平均回收率（%） |
RSD（%，n=3） |
||
豆干 |
0.10 |
99.93 |
101.56 |
103.16 |
101.55 |
1.59 |
1.00 |
94.98 |
95.77 |
92.73 |
94.49 |
1.67 |
|
面包 |
0.10 |
96.00 |
95.83 |
97.92 |
96.58 |
1.20 |
1.00 |
92.32 |
91.49 |
90.55 |
91.45 |
0.97 |
|
（2）豆干和面包中丙酸色谱图
图1豆干中丙酸（空白）液相色谱图
图2 加标浓度为0.10 g/kg的豆干中丙酸液相色谱图
图2 加标浓度为0.10 g/kg的豆干中丙酸液相色谱图
图3 加标浓度为1.00 g/kg的豆干中丙酸液相色谱图
图4面包中丙酸（空白）液相色谱图
图5 加标浓度为0.10 g/kg的面包中丙酸液相色谱图
图6 加标浓度为1.00 g/kg的面包中丙酸液相色谱图
四、订购信息
货号 |
描述 |
包装 |
COHLB6500 |
Copure® HLB, 500 mg/6mL |
50支/盒 |
BN24 |
biocomma® 智能水浴氮吹仪 |
1台/箱 |
SDC-3000-D |
biocomma® 多管涡旋混匀仪 |
1台/箱 |
SF130-22-NL |
NL针式过滤器，直径13 mm，孔径0.22 μm，有机系 |
100个/盒 |
SC2-1 |
2 mL蓝色聚丙烯盖，白色PTFE/红色硅胶垫，9-425 |
100个/盒 |
V2-AL |
2 mL螺纹棕色样品瓶，带书写处11.6*32 mm，9-425 |
100个/盒 |
