鸡蛋和猪肉中氟虫腈及其代谢物残留量的测定(逗点生物 Copure® HLB Lim)
- 2026-06-11 16:36:59
- 逗点生物
鸡蛋和猪肉中氟虫腈及其代谢物残留量的测定(逗点生物 Copure® HLB Lim)
《GB 31658.31-2025 食品安全国家标准 动物性食品中氟虫腈及其代谢物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法》
氟虫腈及其代谢物具有生物毒性，可在猪肉、鸡蛋等动物性食品中残留，是我国食品安全重点管控的兽药残留项目。依据GB 31658.31-2025国标检测要求，畜禽样品基质复杂，含大量脂肪、蛋白等干扰物，易造成基质效应，影响质谱定性定量准确性。本方案采用逗点生物Copure® HLB-Lim系列免活化通过式SPE小柱，针对猪肉、鸡蛋基质差异化选型，简化前处理步骤、高效去除基质干扰；配合基质匹配标准曲线校正目标物损失，结合专用兽残色谱柱与优化流动相体系，方法稳定、回收率良好，可满足实验室日常批量检测与风险监测需求。
一、样品提取
称取试样2g于50mL离心管中，【加标样品加入适量标液】，加入0.2%乙酸乙腈溶液10mL和1g无水硫酸镁，涡旋混匀后，振荡提取10min，于4℃下、8000r/min离心10min，上清液备用。
二、试样净化【①猪肉：Copure® HLB-Lim SPE 100mg/3mL（货号：COHLB3100-Lim）、②鸡蛋：Copure® HLB-LIM-Pro SPE 60mg/3mL（货号：COHLB360-Lim-Pro）】
取备用液3mL直接过固相萃取小柱（小柱免活化），挤干，收集全部流出液于15mL离心管中，从流出液中准确移取2mL于离心管中，40℃氮吹至近干，加入1mL 0.1%甲酸乙腈：0.1%甲酸水=1：1溶解残余物，超声涡旋复溶后，过0.22μm尼龙滤膜，上机测试。
注：
（1）本应用的固相萃取小柱为通过式的，因此不需要活化、淋洗和洗脱步骤。
（2）考虑到小柱有死腔体积，所以本方案采用“先取3mL上清液过柱，收集流出液，在从流出液中取2mL氮吹”的方式。
（3）试验过程中发现，对于肉类，小柱规格为100mg/3mL的回收率比规格为60mg/3mL的回收率更好，因此对于肉类样品本应用选择了100mg/3mL规格的小柱。
三、基质曲线的配制
选同类型空白样品，按上述前处理方法进行操作，往6份2mL流出液中加入适量的标液后与样品一同氮吹复溶，配制成上机浓度分别为0.2ng/mL、0.4ng/mL、1ng/mL、2ng/mL、5ng/mL、10ng/mL的标准曲线。
注：配制基质标曲时，在流出液中加入标液再氮吹，可以有效校正氮吹损失。
四、仪器条件
色谱条件
仪器：UPLC-MS/MS（Thermo Fisher TSQ Endura）
色谱柱：Copure® 兽残专用柱 100x2.1mm，3um（货号：HSC01）
流动相：A：水（0.1%甲酸） B：甲醇：乙腈 =2:8（0.1%甲酸）
洗脱方式：梯度洗脱，见表1
流速：0.3 mL/min
柱温：35℃
表 1 梯度洗脱程序
时间/min |
A% |
B% |
0 |
50 |
50 |
1 |
50 |
50 |
5 |
15 |
85 |
6 |
15 |
85 |
6.1 |
50 |
50 |
10 |
50 |
50 |
质谱条件
离子源：HESI
扫描方式：负离子模式
电喷雾电压：4500 V
鞘气压力：40 arb
辅气压力：2 arb
离子传输管：380 ℃
辅气温度：350 ℃
表2 定性、定量离子对、锥孔电压和碰撞能
物质名称 |
定性离子对(m/z) |
定量离子对(m/z) |
碰撞能量 (V) |
锥孔电压(V) |
电离极性 |
氟甲腈 |
387 |
282 |
21 |
90 |
负离子模式 |
氟甲腈 |
387 |
351 |
21 |
90 |
负离子模式 |
氟虫腈硫醚 |
418.9 |
262 |
19 |
85 |
负离子模式 |
氟虫腈硫醚 |
418.9 |
382.9 |
19 |
85 |
负离子模式 |
氟虫腈 |
434.9 |
250 |
20.5 |
75 |
负离子模式 |
氟虫腈 |
434.9 |
330 |
20.5 |
75 |
负离子模式 |
氟虫腈砜 |
450.9 |
282 |
20 |
75 |
负离子模式 |
氟虫腈砜 |
450.9 |
414.9 |
20 |
75 |
负离子模式 |
五、实验结果
5.1样品加标结果表
样品 |
项目 |
添加水平：1μg/kg |
添加水平：10μg/kg |
||||
回收率% |
平均回收率% |
RSD% |
回收率% |
平均回收率% |
RSD% |
||
鸡蛋 |
氟虫腈 |
83.0 |
87.8 |
4.9 |
103.2 |
105.3 |
4.2 |
88.8 |
102.4 |
||||||
91.5 |
110.3 |
||||||
氟甲腈 |
83.6 |
88.5 |
5.0 |
108.0 |
104.1 |
4.3 |
|
92.3 |
105.2 |
||||||
89.4 |
99.2 |
||||||
氟虫腈砜 |
95.6 |
97.4 |
3.5 |
90.0 |
92.4 |
3.1 |
|
95.4 |
91.7 |
||||||
101.4 |
95.5 |
||||||
氟虫腈亚砜 |
92.0 |
96.0 |
5.7 |
92.1 |
99.0 |
6.7 |
|
102.3 |
99.8 |
||||||
93.8 |
105.2 |
||||||
猪肉 |
氟虫腈 |
80.9 |
82.1 |
2.0 |
93.6 |
95.2 |
1.6 |
83.3 |
95.3 |
||||||
84.0 |
96.7 |
||||||
氟甲腈 |
98.5 |
97.3 |
3.0 |
89.1 |
89.5 |
0.5 |
|
96.2 |
89.9 |
||||||
92.8 |
89.5 |
||||||
氟虫腈砜 |
88.5 |
87.9 |
1.7 |
94.5 |
94.9 |
2.8 |
|
89.1 |
97.8 |
||||||
86.3 |
92.5 |
||||||
氟虫腈亚砜 |
105.5 |
98.5 |
7.1 |
90.2 |
92.0 |
2.9 |
|
98.4 |
95.1 |
||||||
91.5 |
90.7 |
||||||
5.2 色谱图
图1 曲线点为0.4 ng/mL（鸡蛋基质）的氟虫腈及其代谢物离子提取色谱图
图2 添加浓度为1μg/kg鸡蛋中氟虫腈及其代谢物离子提取色谱图
图3 添加浓度为10μg/kg鸡蛋中氟虫腈及其代谢物离子提取色谱图
图4曲线点为0.4 ng/mL（猪肉基质）的氟虫腈及其代谢物离子提取色谱图
图5 鸡蛋（本底）中氟虫腈及其代谢物离子提取色谱图
图6 添加浓度为1μg/kg猪肉中氟虫腈及其代谢物离子提取色谱图
图7 添加浓度为10μg/kg猪肉中氟虫腈及其代谢物离子提取色谱图
六、订购信息
货号 |
描述 |
包装 |
COHLB3100-Lim |
Copure® HLB-lim SPE 100mg/3mL |
50支/盒 |
COHLB360-Lim-Pro |
Copure® HLB-LIM-Pro SPE 60mg/3mL |
50支/盒 |
HSC01 |
Copure® 兽残专用柱 100x2.1mm，3um |
1支/盒 |
SDC-4000 |
biocomma®多管涡旋混匀仪 |
1台/箱 |
SPEMF12G |
玻璃固相萃取装置12孔 |
1台/箱 |
BN24 |
biocomma® 24孔智能氮吹仪 |
1台/箱 |
ASF130-22-NL |
针式过滤器，尼龙，直径13mm，孔径0.22μm，有机系 |
100个/盒 |
SC2-1 |
2 mL蓝色聚丙烯盖，白色PTFE/红色硅胶垫，9-425 |
100个/盒 |
V2-AL |
2 mL螺纹棕色样品瓶，带书写处11.6*32 mm，9-425 |
100个/盒 |
