胰蛋白胨大豆琼脂培养基（TSA）：食品微生物检验中的参比培养基

产品信息

培养基配方

TSA属于非选择性营养琼脂培养基，不含胆盐、染料、抗生素或显色底物，其核心作用是为微生物提供稳定、温和、广谱的生长环境。

培养基中的蛋白胨和大豆蛋白胨为微生物提供氮源、氨基酸、肽类、维生素和其他生长因子，可支持多种细菌、酵母菌和部分霉菌生长。氯化钠用于维持适宜渗透压，避免细胞因渗透压变化受到影响。琼脂作为凝固剂，使培养基形成稳定平板，便于菌落形成、计数和形态观察。

由于TSA没有选择性抑制成分，它不能用于特定目标菌的选择性分离，也不能通过菌落颜色直接完成鉴别。它的价值在于提供可靠的基础生长对照，尤其适合作为参比培养基评价其他培养基的促生长能力。

称取本品 40.0 g，加入蒸馏水或去离子水 1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装后于 121℃高压灭菌15 min，备用。

制备时应充分搅拌和加热，使琼脂完全溶解，避免出现颗粒、沉淀或凝胶不均。灭菌时间不宜随意延长，过度热处理可能造成营养成分下降、颜色加深或pH变化。制备后的平板应表面平整、颜色均一、无污染、无明显气泡、无裂纹和异常冷凝水。

下列质控菌株接种待测试培养基后，应在规定条件下表现出生长良好，且生长率 PR≥0.7。

质控指标	质控菌株及编号	培养条件	质控评定标准
生长率	莫氏克罗诺杆菌 CICC25036	25℃±1℃，48 h±2 h	生长良好，PR≥0.7；黄色、圆形、表面光滑湿润菌落
生长率	大肠埃希氏菌 CMCC(B)44102	36℃±1℃，24 h±2 h	生长良好，PR≥0.7；灰白色、圆形、表面光滑湿润菌落
生长率	金黄色葡萄球菌 CMCC(B)26003	36℃±1℃，24 h±2 h	生长良好，PR≥0.7；淡黄色、圆形菌落
生长率	枯草芽孢杆菌 CMCC(B)63501	36℃±1℃，24 h±2 h	生长良好，PR≥0.7；灰白色、圆形、干燥菌落
生长率	白色念珠菌 CMCC(F)98001	28℃±1℃，72 h～96 h	生长良好，PR≥0.7；白色、圆形、表面光滑湿润菌落
生长率	黑曲霉 CMCC(F)98003	28℃±1℃，72 h～96 h	生长良好，PR≥0.7；产黑色孢子
生长率	粪肠球菌 CICC25037	36℃±1℃，24 h±2 h	生长良好，PR≥0.7；白色、圆形菌落
生长率	人参土芽孢杆菌 CICC25038	36℃±1℃，48 h±2 h	生长良好，PR≥0.7；灰白色、圆形菌落
生长率	藤黄微球菌 CICC10445	36℃±1℃，48 h±2 h	生长良好，PR≥0.7；浅黄色、圆形菌落
生长率	嗜热嗜脂肪地芽孢杆菌 CICC25039	56℃±1℃，24 h±2 h	PR≥0.7；灰白色、圆形、表面光滑湿润菌落

PR表示培养基的生产率或生长率，用于评价培养基对质控菌株的回收能力。作为参比培养基，TSA自身必须具有稳定、可靠的促生长能力，否则会影响后续对其他培养基性能的评价。

在培养基质量控制中，参比培养基相当于“对照标尺”。许多选择性或鉴别性培养基含有胆盐、染料、抗生素、表面活性剂或其他抑制成分，目标菌在这些培养基上的生长可能受到一定影响。通过将同一菌悬液分别接种于待测培养基和TSA，可比较两者的菌落回收情况，从而判断待测培养基是否具有足够的促生长能力。

TSA营养较全面、选择性压力低，适合用作多类微生物的生长对照。其质控菌株覆盖革兰氏阴性杆菌、革兰氏阳性球菌、芽孢杆菌、酵母菌、霉菌和嗜热芽孢菌，能够较全面地反映培养基的广谱支持能力。

干粉培养基应密封、避光、干燥保存，防止吸潮、结块和变色。开瓶后应及时旋紧瓶盖，取用时避免湿勺或污染器具接触瓶内粉末。

制备后的平板应按实验室SOP保存，并在经验证的有效期内使用。使用前应检查平板是否存在污染、开裂、失水、冷凝水过多、颜色异常或表面不平整等情况。对于参比培养基，建议每批次进行外观、无菌性和促生长能力检查，确保结果可靠。

若质控菌株普遍生长不良，应重点排查培养基称量、溶解、灭菌、pH、保存条件和培养箱温度；若仅单一菌株异常，则应同时检查该菌株活力、传代次数、接种量和培养条件。

胰蛋白胨大豆琼脂培养基（TSA）是一种经典的非选择性营养培养基，也是食品微生物检验中重要的参比培养基。其通过蛋白胨和大豆蛋白胨提供丰富营养，以氯化钠维持渗透压，并以琼脂形成稳定固体培养表面，可支持多种细菌、酵母菌和霉菌生长。

在质量控制中，多种代表性菌株应在规定培养条件下达到 PR≥0.7，并表现出典型生长特征。只有确保TSA配制规范、无菌性良好、pH稳定、促生长能力合格，才能使其在培养基性能评价、菌株复苏和食品微生物检验中发挥可靠的参比作用。