孟加拉红培养基：霉菌和酵母计数中的选择性培养基
- 2026-06-18 14:05:45
- 逗点生物
孟加拉红培养基：霉菌和酵母计数中的选择性培养基
产品信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | 孟加拉红培养基 |
| 英文名称 | Rose Bengal Medium |
| 产品货号 | GF1004 |
| 产品规格 | 250 g/瓶 |
| 保质期 | 三年 |
| 产品用途 | 用于霉菌和酵母的计数、分离和培养 |
| 配制量 | 36.6 g/L |
| 培养条件 | 28℃±1℃，需氧培养120 h |
培养基配方
| 成分 | 含量（g/L） | 主要作用 | 在培养基中的用途 |
|---|---|---|---|
| 蛋白胨 | 5.0 | 提供氮源、氨基酸、多肽及部分维生素 | 满足霉菌和酵母细胞合成蛋白质、核酸及代谢酶的需求，是培养基的主要营养来源之一 |
| 葡萄糖 | 10.0 | 提供易利用的碳源和能量 | 促进霉菌菌丝生长和酵母繁殖，提高菌落形成速度和检出率 |
| 磷酸二氢钾 | 1.0 | 提供磷元素并构成缓冲体系 | 维持培养基pH稳定，减少代谢产酸或产碱对微生物生长的影响，同时参与细胞能量代谢 |
| 硫酸镁（无水） | 0.5 | 提供镁离子和硫元素 | 镁离子是多种酶的辅助因子，可促进细胞代谢、孢子萌发和菌丝生长 |
| 琼脂 | 20.0 | 凝固剂 | 形成稳定的固体培养基表面，为菌落分离、生长和计数提供支撑环境 |
| 孟加拉红 | 0.033 | 抑制部分细菌，限制霉菌菌落扩展，并辅助菌落观察 | 防止快速生长霉菌覆盖整个平板，减少菌落重叠，提高计数准确性，同时使菌落轮廓更加清晰 |
| 氯霉素 | 0.1 | 抑制细菌生长，提高培养基选择性 | 降低食品样品中伴生细菌对霉菌和酵母检测的干扰，提高目标菌检出效果 |
检验原理
孟加拉红培养基的核心作用是为霉菌和酵母提供适宜营养，同时抑制细菌干扰。蛋白胨提供氮源和生长所需的基础营养，葡萄糖为霉菌和酵母提供能量来源，磷酸二氢钾和硫酸镁帮助维持较稳定的培养环境，琼脂形成固体培养基表面，便于菌落形成和计数。
孟加拉红是该培养基的重要选择性和辅助观察成分。一方面，它可对部分细菌产生抑制作用；另一方面，它能够限制某些快速生长霉菌菌落的直径和高度，减少菌落蔓延、重叠和融合，使计数更准确。孟加拉红还具有着色作用，霉菌或酵母菌落吸收后更易观察。
氯霉素属于广谱抗生素，在本培养基中主要用于抑制细菌背景菌生长。由于多数食品样品中的细菌生长速度远快于霉菌和酵母，如果不加以抑制，细菌可能迅速覆盖平板表面，影响目标菌的分离和计数。氯霉素的加入能够有效提高培养基对真菌检测的选择性。
使用方法
称取本品 36.6 g，加入蒸馏水或去离子水 1 L，搅拌加热至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15 min。
制备时应充分溶解琼脂和各营养成分，避免局部焦化或沉淀。灭菌后冷却至适宜温度再倾注平板，平板应表面平整、颜色均一、无污染、无明显气泡和沉淀。由于霉菌和酵母培养时间较长，平板水分状态非常重要：平板过湿容易造成孢子扩散和菌落融合，过干则可能影响孢子萌发和菌落形成。
质量控制
按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，于 28℃±1℃需氧培养120 h，结果应符合下表要求。
| 质控指标 | 质控菌株及编号 | 质控评定标准 |
|---|---|---|
| 生长率 | 酿酒酵母菌 ATCC 9763 | PR≥0.7，奶油色菌落 |
| 生长率 | 黑曲霉 ATCC 16404 | PR≥0.7，白色菌丝，黑色孢子 |
| 选择性 | 大肠埃希氏菌 ATCC 25922 | G≤1 |
| 选择性 | 金黄色葡萄球菌 ATCC 6538 | G≤1 |
PR表示培养基对目标菌的促生长能力。酿酒酵母和黑曲霉应能在规定条件下良好生长，说明培养基能够支持酵母菌和霉菌形成典型菌落。G值用于评价选择性，大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌应受到明显抑制，说明孟加拉红和氯霉素的选择性作用有效。
典型结果与判读要点
酿酒酵母在孟加拉红培养基上通常形成奶油色、圆形菌落；黑曲霉先形成白色菌丝，随后产生黑色孢子。霉菌和酵母菌落生长速度不同，计数时应在标准规定培养时间内观察，避免过早计数导致漏检，也避免培养过久造成菌落融合。
孟加拉红培养基用于霉菌和酵母计数，并不用于真菌种属的最终鉴定。不同霉菌在培养基上的菌落颜色、形态和产孢特征可作为初步观察依据，但若需要确认菌种，应结合显微镜形态、生化鉴定、质谱或分子生物学方法。
常见问题与控制建议
如果酿酒酵母或黑曲霉生长不良，应重点检查培养基是否过度灭菌、pH是否异常、干粉是否吸潮、平板是否过干、培养温度是否准确以及质控菌株活力是否正常。
如果大肠埃希氏菌或金黄色葡萄球菌抑制不足，应检查氯霉素有效性、培养基配制量、灭菌条件和保存状态。由于氯霉素对热稳定性和配方体系有一定要求，若培养基反复加热或保存不当，可能影响选择性。
平板保存过程中应避免强光照射。孟加拉红属于光敏性染料，长时间强光暴露可能影响培养基性能。制备后的平板应按实验室SOP避光、低温、密封保存，并在经验证的有效期内使用。
总结
孟加拉红培养基是一种用于霉菌和酵母计数、分离和培养的常用选择性培养基。其通过蛋白胨和葡萄糖提供营养，以磷酸盐和镁盐维持适宜生长环境，通过孟加拉红限制霉菌菌落扩展并辅助观察，再由氯霉素抑制细菌干扰。
本产品质量控制中，酿酒酵母菌 ATCC 9763 和黑曲霉 ATCC 16404 应达到 PR≥0.7，大肠埃希氏菌 ATCC 25922 和金黄色葡萄球菌 ATCC 6538 应受到明显抑制。只有在促生长能力、选择性、无菌性、平板水分和保存条件均受控的情况下，孟加拉红培养基才能为食品中霉菌和酵母计数提供可靠结果。
