磷酸盐缓冲液（PBS）：食品微生物检验中常用的样品稀释液

产品信息

配方组成

检验原理

磷酸盐缓冲液的核心作用是 维持样品稀释过程中的pH稳定。食品样品类型复杂，可能呈酸性、碱性或含有较强缓冲成分。如果直接用纯水稀释，微生物可能因渗透压或pH突然变化受到损伤，导致菌落回收率下降。

本产品配方中，磷酸二氢钾与氢氧化钠共同形成磷酸盐缓冲体系，使工作液pH保持在7.2±0.1左右。原资料中“磷酸二氢钠与氢氧化钠”应修正为“磷酸二氢钾与氢氧化钠”，因为配方表中列出的实际成分为磷酸二氢钾。

与营养肉汤或培养基不同，PBS不提供明显促生长营养，也不用于培养扩增。它的功能是作为样品稀释液，使微生物在样品处理、振荡、均质和短时间放置过程中保持相对稳定的生理状态，从而提高检测结果的准确性和重复性。

使用方法

称取本品 41.0 g，加入蒸馏水或去离子水 1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，制成贮存液，并按要求贮存于冰箱。

使用前取该贮存液 1.25 mL，用蒸馏水或去离子水稀释至 1 L，再经 121℃高压灭菌15 min 后备用。

需要特别注意的是，本品不是直接将41.0 g/L作为最终稀释液使用，而是先配制成高浓度贮存液，再按比例稀释成工作液。如果误将贮存液直接用于样品稀释，盐浓度和缓冲强度都会明显偏高，可能影响微生物存活和检测结果。

质量控制

下列质控菌株接种待测试PBS工作液后，于 25℃放置45 min，比较放置前后菌落数变化，结果应符合要求。

这里的“生长率”更准确地理解为 菌数稳定性或无抑制性评价。PBS不是培养基，25℃放置45 min并不是为了让细菌增殖，而是评价稀释液在短时间接触过程中是否明显杀伤或抑制细菌。放置前后菌落数变化在±50%以内，说明该稀释液对测试菌株影响较小，适合用于样品稀释。

应用场景

PBS常用于食品样品的初始匀液制备和系列稀释。例如，在菌落总数检测中，样品经均质后需要进行十倍系列稀释，再接种至相应计数培养基；在大肠菌群检测中，也常用于样品匀液和后续稀释步骤。

PBS的优势在于pH相对稳定，适用于部分酸碱度可能影响菌体状态的样品。与0.85%生理盐水相比，PBS具有一定缓冲能力；与蛋白胨水等稀释液相比，PBS营养性较低，更适合用于短时间稀释和维持菌数稳定，而不是复苏或增菌。

使用注意事项

配制PBS时应准确称量，充分溶解，避免粉末残留或局部浓度不均。贮存液应按要求冰箱保存，使用前按比例稀释为工作液，并经灭菌后使用。工作液制备后应检查澄清度、pH和无菌性，如出现浑浊、沉淀、污染或pH异常，应停止使用。

样品从制备到接种通常应尽量缩短时间，避免长时间放置导致微生物死亡或数量变化。对于酸性、碱性、高盐、高糖、含防腐剂或含抑菌成分的样品，PBS只能在一定程度上维持pH稳定，不能完全消除样品基质对微生物的影响，必要时应按标准方法进行方法适用性确认。

干粉产品应密封、避光、干燥保存，防止吸潮结块。称量时应避免粉尘吸入，建议在通风良好环境中操作，并佩戴必要的防护用品。开瓶后应及时旋紧瓶盖，防止水分进入影响配方准确性和后续溶解性。

总结

磷酸盐缓冲液（PBS）是食品微生物检验中常用的样品稀释液，主要用于菌落总数、大肠菌群等项目的样品处理和系列稀释。它通过磷酸二氢钾与氢氧化钠形成pH约7.2的缓冲体系，在短时间内维持微生物相对稳定的生理环境。

本产品使用时应先按 41.0 g/L 配制贮存液，再取 1.25 mL 贮存液稀释至 1 L，经灭菌后作为工作液使用。质量控制中，大肠埃希氏菌 ATCC 25922 和金黄色葡萄球菌 ATCC 6538 在25℃放置45 min后，菌落数变化应在±50%以内。只有正确区分贮存液和工作液、控制pH、无菌性和菌数稳定性，PBS才能在食品微生物检验中发挥可靠的样品稀释作用。