GB 4789.28—2024《培养基和试剂的质量要求》新版标准主要变化解读

GB 4789.28—2024《食品安全国家标准 食品微生物学检验 培养基和试剂的质量要求》已正式代替 GB 4789.28—2013。作为食品微生物检验中培养基和试剂质量控制的重要基础标准，本次修订并不是简单的文字调整，而是围绕培养基验收、性能测试、参比培养基、质控菌株和部分培养基质量要求进行了系统更新。对于食品生产企业、第三方检测实验室以及培养基生产企业来说，新版标准更强调方法统一、结果可靠和质量控制的可追溯性。

一、商品化培养基管理更加明确

新版标准对商品化即用型培养基的范围进行了补充，明确将测试片等载体形式纳入即用型培养基的质量控制范围。这一变化适应了目前食品微生物快速检测产品的发展趋势。也就是说，实验室使用的即用型平板、液体培养基、半固体培养基以及测试片类产品，都需要关注其适用的质量控制要求。

同时，新版标准删除了原先实验室验收商品化培养基时使用的部分简化评价方法，使商品化培养基的验收要求更接近生产商出厂检验的质量控制逻辑。这样做的目的，是减少人为因素和半定量方法带来的判断偏差，使培养基质量评价更加客观、统一。

对于使用单位而言，新版标准也更加符合实际操作情况。考虑到许多食品企业和实验室并不具备完整重复出厂检验的条件，标准明确：在生产商能够提供符合要求的第三方检测报告或质量证明资料的情况下，使用者可根据自身风险评估和检测需求，选择是否进行重复测试。也就是说，实验室并非必须对每一批商品化培养基完整重复出厂检验，但应建立适合自身检验工作的验收和确认机制。

二、培养基制备细节更加贴近实际操作

新版标准对培养基制备过程中的一些细节进行了修订。例如，关于培养基分装量，原标准中“容器体积至少比培养基体积大 20%”的表述，调整为培养基体积不应超过容器容量的 2/3。这一要求更直观，也更符合高压灭菌和混匀操作的实际需求。

培养基装量过多时，在灭菌升温、保温、降温以及出锅摇匀过程中，容易出现沸溢、喷溅或混合不均匀等问题，甚至可能影响培养基成分稳定性和最终检测结果。因此，控制分装体积不仅是安全操作要求，也是保证培养基质量一致性的重要环节。

此外，标准中关于实验用水的电导率/电阻率表述也进行了修正，避免因单位或数值表述问题造成理解偏差。对于培养基生产和实验室配制来说，水质仍是影响培养基质量的重要因素，应根据标准要求和实验室质量体系进行监控。

三、质量评价思路由“项目罗列”转向“性能验证”

GB 4789.28—2024 对培养基和试剂的评价指标进行了调整，部分理化项目不再逐项详细规定，而是更强调根据培养基用途、检测方法和实验室能力对关键质量指标进行控制。

这一变化体现了培养基质量控制思路的转变：培养基是否合格，不仅取决于外观、pH、凝胶强度等理化指标，更重要的是其能否支持目标菌良好生长、能否抑制非目标菌、能否表现出正确的选择性和特异性反应。因此，新版标准更加重视微生物性能测试结果。

对于培养基生产企业来说，即使标准删除了部分即用型培养基微生物污染控制检验项目，实际生产中仍应保留必要的无菌性或污染控制检查。因为即用型产品在运输、储存和使用前已经经历一定时间，使用者可通过外观和空白对照发现明显污染，但生产端仍需要通过过程控制和成品检验确保产品安全可靠。

四、固体培养基接种量和特异性测试方法调整

新版标准对固体培养基质量控制中的接种量提出了更明确的要求。原标准中常用的接种范围为 20～200 CFU，新版标准根据不同测试目的进行了细化。例如，用于细菌和酵母菌计数的接种量调整为 50～250 CFU；霉菌计数因菌落容易扩散，接种量通常控制在 30～150 CFU 更利于观察和计数。

这一调整更符合实际培养结果的稳定性。接种量过低时，计数误差容易放大；接种量过高时，菌落可能重叠、融合或扩散，影响回收率和生长特征判断。新版标准将不同类型微生物分别限定接种范围，有利于提高培养基性能测试的重复性和可比性。

在特异性测试方面，新版标准将原先的平行直线划线方式调整为分区划线。分区划线更容易获得单个菌落，便于观察菌落大小、颜色、沉淀环、溶血现象、透明圈等典型特征。相比之下，平行直线划线有时难以分离出独立菌落，容易影响对培养基鉴别性能的判断。

五、选择性增菌培养基测试方法更合理

选择性增菌培养基的质量控制方法也有明显变化。旧版标准中，常采用目标菌与非目标菌混合接种的方式，例如接种 10～100 CFU 目标菌，同时加入较高数量的非目标菌，再经增菌后划线至选择性平板观察结果。

新版标准将目标菌测试调整为仅接种 10～100 CFU 目标菌，增菌后再涂布或划线接种至选择性平板计数。这一变化使测试重点更集中于培养基对低水平目标菌的复苏和增殖能力，减少混合菌体系中菌间竞争、非目标菌数量波动以及操作差异带来的影响。

对于选择性增菌培养基而言，核心性能包括两个方面：一是低接种量目标菌能否被有效增殖；二是培养基配方是否具有适当选择性，避免非目标菌过度干扰检测。新版方法更有利于评价目标菌的增菌效果，也便于实验室获得稳定、可重复的检测结果。

六、新增参比培养基概念，质量控制更可追溯

新版标准新增了参比培养基的质量控制要求，这是本次修订中的重点内容之一。参比培养基用于作为待测培养基计数或生长性能评价的对照培养基，其质量直接影响培养基性能测试结论。

常见参比培养基包括：常规细菌使用胰酪大豆琼脂（TSA）作为参比培养基；真菌使用沙氏葡萄糖琼脂（SDA）作为参比培养基；乳酸菌使用 MRS 培养基作为参比培养基。部分特殊微生物的参比培养基则会在基础培养基上进行调整，例如弧菌相关测试中可使用添加氯化钠的 TSA 作为参比培养基。

参比培养基并不是普通对照培养基，其本身也需要经过严格质量控制。只有参比培养基可靠，待测培养基的生长率、选择性和特异性评价才有意义。因此，新版标准将参比培养基纳入明确管理，有助于提高不同实验室之间检测结果的一致性。

七、质控菌株体系更加本土化

新版标准对测试菌株进行了较大调整，增加了 CMCC、CICC 等国内菌种资源编号，同时对部分菌株名称和分类学名称进行了修订。随着国内菌种保藏体系不断完善，许多国内保藏中心的菌株已经能够满足培养基质量控制需求，并可作为 ATCC 等国外菌株的等效替代资源使用。

这一变化对实验室和培养基生产企业具有实际意义。一方面，可降低购买和维护国外菌株的成本；另一方面，也方便企业和检测机构从国内正规菌种保藏中心获得质控菌株，提高菌株来源的可及性和可追溯性。

需要注意的是，菌株替代并不等于随意替换。实验室在使用等效菌株时，应确认其来源、编号、代次、保存方式和适用标准要求，并建立菌株复苏、传代、保存和使用记录。

八、菌株保存和原料说明更加贴近行业现状

新版标准对菌种保存推荐方法进行了调整，例如附录中推荐的冷冻保存液由原先含 10%～15% 甘油的 TSB，调整为含 40%～60% 甘油的 BHI 等保存体系。较高浓度甘油可在低温保存中发挥更好的保护作用，有利于维持菌株活性和遗传稳定性。

在原料说明方面，新版标准也对蛋白胨、浸粉、胆盐等培养基原料的名称和描述进行了更新，更贴近当前市场供应情况。例如，过去常见的牛肉膏、酵母浸膏等名称，在实际生产中已大量被牛肉浸粉、酵母浸粉等形式替代。这类原料保存期更长、使用更方便，也更符合现代培养基工业化生产需求。

但无论原料名称如何变化，培养基生产中仍应重视原料批间差异。蛋白胨、酵母浸粉、牛肉浸粉、胆盐等天然或半天然来源原料，均可能因来源、工艺和批次不同而影响培养基的促生长能力、选择性和显色反应。

九、部分培养基质量要求发生调整

新版标准对多种培养基的质量要求进行了修订，涉及培养时间、参比培养基、质控菌株和结果判定等多个方面。有些变化是培养时间范围的优化，例如将固定培养 24 h 调整为 18～24 h，使实验室操作更灵活；有些变化则涉及参比计数培养基的调整，例如弯曲菌、链球菌等特殊菌种的参比培养基需要添加脱纤维血等成分，以更好满足其生长需求。

部分培养基的质控项目也发生了较大变化。例如，某些培养基删除了不必要的质控菌株，或将原来的定量接种调整为定性接种；血平板相关质控中，也对用于观察 α 溶血、β 溶血等现象的菌株进行了更合理的修订。这些调整的目的，是让培养基质控更贴近实际检测用途，避免使用不适合的菌株或不稳定的判定指标。

此外，新版标准还新增了多种培养基以及 PCR 试剂盒的质量控制要求。随着 GB 4789 系列食品微生物检验标准不断完善，培养基和试剂的覆盖范围也在扩大，质量控制体系将更加系统化。

十、对实验室和培养基生产企业的影响

对于实验室来说，GB 4789.28—2024 的实施意味着培养基验收和使用管理需要进一步规范。实验室应根据新版标准修订内部文件，明确商品化培养基验收、参比培养基选择、质控菌株管理、培养基性能测试和记录保存要求。对于有第三方检测报告的商品化培养基，可结合风险评估确定是否重复测试，但不应完全忽视到货验收、储存条件、批号记录和空白对照。

对于培养基生产企业来说，新版标准对出厂检验、质控菌株、参比培养基和检测方法提出了更高要求。企业不仅要关注配方和生产工艺，还应建立稳定的质量评价体系，确保不同批次产品在促生长能力、选择性、特异性和稳定性方面保持一致。

总体来看，GB 4789.28—2024 的修订方向是更加科学、统一和可操作。它弱化了部分形式化指标，强化了培养基实际性能评价；减少了简化验收方法带来的不确定性，增加了参比培养基和国内质控菌株的应用。对于食品微生物检测行业而言，新版标准有助于提升培养基和试剂质量控制水平，也有助于提高检测结果的准确性和可比性。