木糖赖氨酸脱氧胆盐（XLD）琼脂：沙门氏菌和志贺氏菌分离培养的经典选择性培养基
- 2026-06-18 15:58:29
- 逗点生物
木糖赖氨酸脱氧胆盐（XLD）琼脂：沙门氏菌和志贺氏菌分离培养的经典选择性培养基
产品基本信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | 木糖赖氨酸脱氧胆盐（XLD）琼脂（沙门） |
| 英文名称 | Xylose Lysine Desoxycholate Agar |
| 产品货号 | GF1022 |
| 产品规格 | 250 g/瓶 |
| 产品用途 | 用于沙门氏菌、志贺氏菌等肠杆菌科革兰氏阴性肠杆菌的分离培养 |
| 参考方法 | ISO、FDA BAM、GB 等标准方法 |
| 保质期 | 三年 |
配方组成、用量、作用及用途
| 成分 | 用量（g/L） | 主要作用 | 用途说明 |
|---|---|---|---|
| 酵母膏 | 3.0 | 提供氮源、维生素和生长因子 | 支持沙门氏菌、志贺氏菌及其他肠杆菌生长 |
| L-赖氨酸 | 5.0 | 参与赖氨酸脱羧反应 | 用于鉴别沙门氏菌等可使培养基由酸性转回碱性的菌株 |
| 木糖 | 3.75 | 可发酵糖类 | 沙门氏菌通常可先发酵木糖产酸，使培养基短暂变黄 |
| 乳糖 | 7.5 | 可发酵糖类 | 乳糖阳性菌可持续产酸，常形成黄色菌落，有助于与沙门氏菌区分 |
| 蔗糖 | 7.5 | 可发酵糖类 | 蔗糖阳性菌可产酸，使菌落或培养基呈黄色 |
| 去氧胆酸钠 | 2.5 | 选择性抑制剂 | 抑制革兰氏阳性菌及部分非目标菌，提高肠道革兰氏阴性菌分离选择性 |
| 柠檬酸铁铵 | 0.8 | 铁盐指示剂 | 与硫化氢反应生成黑色硫化铁，用于观察 H₂S 阳性反应 |
| 硫代硫酸钠 | 6.8 | 硫源 | 被部分细菌还原产生硫化氢，是黑心或黑色菌落形成的基础 |
| 氯化钠 | 5.0 | 维持渗透压 | 保持细菌正常生长所需的渗透压环境 |
| 琼脂 | 15.0 | 凝固剂 | 形成固体平板，便于菌落分离、观察和挑取 |
| 酚红 | 0.08 | pH 指示剂 | 酸性时呈黄色，碱性或中性偏碱时呈红色，用于显示糖发酵和脱羧反应 |
| 最终 pH（25℃） | 7.4 ± 0.2 | 提供适宜反应环境 | 保证选择性、促生长能力和显色反应稳定 |
检验原理
XLD 琼脂的核心鉴别机制包括糖发酵、赖氨酸脱羧和硫化氢产生三部分。
多数非致病性肠杆菌，如部分大肠埃希氏菌，可发酵乳糖或蔗糖并持续产酸，使酚红指示剂变黄，菌落通常表现为黄色。沙门氏菌通常可发酵木糖，早期也会产酸，但随后可利用赖氨酸发生脱羧反应，使局部环境重新转为碱性，因此典型沙门氏菌菌落常表现为红色或红色带黑心。若菌株还能还原硫代硫酸钠产生硫化氢，硫化氢与柠檬酸铁铵中的铁离子结合，形成黑色硫化铁沉淀，菌落中心或整体可呈黑色。
志贺氏菌通常不发酵木糖，也不产生硫化氢，因此在 XLD 琼脂上常形成红色、淡红色或无色透明菌落，无黑心。但不同志贺氏菌种和菌株表现可能存在差异，实际判读应结合标准方法和后续确证试验。
去氧胆酸钠是培养基中的主要选择性成分，可抑制革兰氏阳性菌，使肠杆菌科细菌更容易被分离出来。但该培养基并不能只允许沙门氏菌或志贺氏菌生长，部分其他肠杆菌也可能形成相似菌落，因此 XLD 平板上的可疑菌落必须进一步进行生化鉴定、血清学试验或分子检测确认。
使用方法
称取本品 56.9 g，加入蒸馏水或去离子水 1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，冷却至约 50℃ 后倾注平板备用。
XLD 琼脂通常采用加热煮沸溶解后直接倾注的方式制备，不建议进行高压灭菌。过度加热或高压灭菌可能影响糖类、胆盐和指示剂系统的稳定性，导致培养基颜色异常、选择性下降或菌落特征不典型。配制过程中应避免长时间反复加热，溶解后应尽快冷却并倾注平板。
典型菌落特征
在 36℃培养 24 h 后，不同菌株在 XLD 琼脂上的菌落表现通常具有一定差异。
| 菌株或菌群 | 典型表现 |
|---|---|
| 沙门氏菌 | 红色菌落，常带黑心；H₂S 产生强的菌株可形成黑色菌落 |
| 志贺氏菌 | 无色至红色菌落，通常无黑心 |
| 大肠埃希氏菌等乳糖发酵菌 | 黄色菌落或黄色区域 |
| 金黄色葡萄球菌 | 生长受到明显抑制或不生长 |
需要注意的是，菌落颜色受培养时间、接种量、菌株代谢特征和平板状态影响。若培养时间过长，部分菌落颜色可能发生变化，导致判读困难。因此应按照标准规定的培养时间进行观察，并及时挑取可疑菌落。
质量控制
下列质控菌株接种后，于 36℃培养 24 h，观察生长和菌落特征。
| 质控指标 | 质控菌株及编号 | 质控评定标准 |
|---|---|---|
| 生长率 | 鼠伤寒沙门氏菌 ATCC 14028 | PR ≥ 0.5，黑色菌落 |
| 生长率 | 福氏志贺氏菌 CMCC（B）51572 | PR ≥ 0.5，无色菌落，无黑心 |
| 选择性 | 大肠埃希氏菌 ATCC 25922 | G＜5，黄色菌落 |
| 选择性 | 金黄色葡萄球菌 ATCC 6538 | G≤1，生长应受到明显抑制 |
PR 值用于评价培养基对目标菌或相关指示菌的促生长能力。若沙门氏菌生长率偏低或黑心不明显，应检查培养基配制浓度、加热时间、pH、平板储存状态、硫化氢指示系统以及菌株活性。若大肠埃希氏菌生长过多或金黄色葡萄球菌未被有效抑制，则需重点排查去氧胆酸钠选择性、培养基储存条件和配制过程是否符合要求。
使用注意事项
XLD 琼脂不得用于临床诊断用途。干粉培养基使用后应立即密封，置于避光、干燥处保存，防止吸潮、结块或成分降解。称量时应注意粉尘防护，必要时佩戴口罩操作。
制备平板时，应确保培养基完全溶解但避免过度加热。倾注后的平板应颜色均匀、表面平整，无污染、无明显析水、无干裂和异常沉淀。若平板颜色明显异常，或出现污染、失水、析水严重等情况，不宜用于正式检测。
在结果判读时，应将典型黑心或黑色菌落作为疑似沙门氏菌菌落进行挑取，将无色或淡红色无黑心菌落作为疑似志贺氏菌菌落进行进一步确认。但 XLD 平板只能用于初步筛选和分离，不能作为最终鉴定依据。疑似菌落仍需按照 ISO、FDA BAM、GB 等相关标准方法进行后续确证。
总体而言，木糖赖氨酸脱氧胆盐（XLD）琼脂通过糖发酵、赖氨酸脱羧、硫化氢反应和胆盐选择性抑菌的组合设计，可有效用于沙门氏菌、志贺氏菌及相关肠杆菌的分离培养，是食品、环境和相关样品微生物检测中常用的选择性鉴别培养基之一。
