营养肉汤(NB):一般细菌增菌培养常用基础培养基

2026-06-18 16:44:11
逗点生物
简介

营养肉汤(NB):一般细菌增菌培养常用基础培养基

产品基本信息

项目 内容
产品名称 营养肉汤(NB)
英文名称 Nutrient Broth
产品货号 GF1025
产品规格 250 g/瓶
产品用途 用于一般细菌的增菌培养、菌种活化、传代复壮等,也可用于消毒效果评定
保质期 三年

配方组成、用量、作用及用途

成分 用量(g/L) 主要作用 用途说明
蛋白胨 10.0 提供氮源、氨基酸、短肽及部分碳源 作为主要营养来源,支持一般细菌生长和增殖
牛肉膏 3.0 提供维生素、生长因子、氨基酸、有机酸和可利用碳氮源 补充复杂营养物质,促进细菌恢复、活化和稳定生长
氯化钠 5.0 维持培养基适宜渗透压 保持细菌细胞正常生理状态,减少渗透压异常对生长的影响
最终 pH(25℃) 7.4 ± 0.2 提供接近中性的生长环境 适合多数常见非苛养细菌生长,有助于培养结果稳定

培养基原理

营养肉汤的核心功能是提供细菌生长所需的基础营养。蛋白胨由蛋白质水解制得,含有细菌易利用的短肽、氨基酸和氮源,是细菌增殖的主要营养基础。牛肉膏则提供维生素、核苷酸、有机酸和多种生长促进物质,可改善细菌生长状态。

氯化钠用于维持适宜渗透压,使细菌在培养过程中保持较稳定的细胞内外环境。培养基 pH 控制在 7.4 ± 0.2,接近多数常见细菌适宜生长的中性至微碱性范围,有利于大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌等常见菌株生长。

在消毒效果评定中,营养肉汤可用于观察消毒处理后微生物是否仍能恢复生长。若培养后肉汤变浑浊,通常提示有微生物增殖;若肉汤保持澄清,则提示在该条件下未观察到明显生长。但最终判读应结合具体试验方法、接种量、培养条件和对照结果。

使用方法

称取本品 18.0 g,加入蒸馏水或去离子水 1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装后于 121℃高压灭菌 15 min,冷却备用。

配制时应确保干粉完全溶解,分装容器应洁净并适合高压灭菌。灭菌后培养基应澄清或基本澄清,无污染、无异常沉淀和明显颜色变化。使用前应检查培养基状态,若出现浑浊、絮状物、异味或容器破损,不宜用于正式试验。

典型应用

营养肉汤常用于一般细菌的增菌培养、菌种活化、菌液制备、传代复壮及微生物实验中的基础培养步骤。对于大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌等常见非苛养菌,NB 通常能够提供良好的生长环境。

在消毒效果评定中,营养肉汤可作为恢复培养基,用于判断处理后微生物是否仍具有增殖能力。但需注意,NB 不含中和剂,若用于含残留消毒剂样品的检测,应根据具体消毒剂类型和标准方法选择合适的中和剂或中和培养体系,避免消毒剂残留继续抑制细菌生长而造成误判。

质量控制

下列质控菌株接种待测试培养基后,于 36℃培养 24 h,观察生长情况。

质控指标 质控菌株及编号 质控评定标准
生长率 大肠埃希氏菌 ATCC 25922 混浊度 2,或菌成片状生长
生长率 金黄色葡萄球菌 ATCC 25923 混浊度 2,或菌成片状生长
生长率 枯草芽孢杆菌 CMCC(B)63542 混浊度 2,或菌成片状生长

营养肉汤作为基础增菌培养基,应能支持上述常见质控菌株良好生长。若培养后肉汤不浑浊或生长明显偏弱,应检查培养基称量是否准确、溶解是否充分、灭菌条件是否合适、pH 是否偏离、干粉是否吸潮以及菌株活性和接种量是否符合要求。

使用注意事项

营养肉汤为非选择性液体培养基,不能用于直接分离单个菌落,也不能替代选择性培养基进行特定目标菌筛选。若样品背景菌复杂,需根据检测目的选择相应的选择性增菌或选择性分离培养基。

干粉培养基使用后应立即密封,置于避光、干燥处保存,防止吸潮、结块或成分降解。配制后的培养基应按实验室规定条件保存,并在验证有效期内使用。使用过程中应严格执行无菌操作,避免外源微生物污染影响结果判断。

总体而言,营养肉汤(NB)是一种配方简洁、营养适中、应用广泛的基础液体培养基,适用于一般非苛养细菌的增菌培养、菌种活化和消毒效果评定等场景,是微生物实验室常用的基础培养基之一。