月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LST):大肠菌群多管发酵法常用培养基

2026-06-18 16:46:24
逗点生物
简介

月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LST):大肠菌群多管发酵法常用培养基

产品基本信息

项目 内容
产品名称 月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LST)
英文名称 Lauryl Sulfate Tryptose Broth
产品货号 GF1026
产品规格 250 g/瓶
产品用途 用于多管发酵法测定大肠菌群和粪大肠菌群,也可用于大肠埃希氏菌相关检测流程
保质期 三年

配方组成、用量、作用及用途

成分 用量(g/L) 主要作用 用途说明
胰蛋白胨 20.0 提供氮源、氨基酸、短肽、维生素和生长因子 支持大肠菌群、粪大肠菌群及大肠埃希氏菌等目标菌生长
氯化钠 5.0 维持培养基渗透压 保持细菌细胞正常生理状态,保证培养体系稳定
乳糖 5.0 可发酵糖类 作为大肠菌群发酵产酸产气的主要碳源,是多管发酵法判读的重要底物
磷酸氢二钾 2.75 缓冲盐组分 与磷酸二氢钾共同形成磷酸盐缓冲体系,减轻发酵产酸造成的 pH 剧烈波动
磷酸二氢钾 2.75 缓冲盐组分 维持培养基酸碱环境相对稳定,有利于目标菌持续生长和发酵产气
月桂基硫酸钠 0.1 选择性抑制剂 抑制部分革兰氏阳性菌和非大肠菌群类杂菌,增强对大肠菌群的选择性
最终 pH(25℃) 6.8 ± 0.2 提供适宜生长与发酵环境 有利于大肠菌群生长、乳糖发酵和产气反应稳定表现

检验原理

LST 肉汤用于大肠菌群检测时,通常配合倒置小导管使用。若目标菌能够利用乳糖发酵并产生气体,培养后肉汤会出现浑浊,倒置小导管内可见气体积聚。多管发酵法正是通过不同稀释度或不同接种量下的阳性管数,进一步进行定性或最可能数法(MPN)统计。

胰蛋白胨为菌体生长提供氮源和生长因子,乳糖作为发酵底物被大肠菌群利用后产生酸和气体。氯化钠维持渗透压,磷酸盐缓冲体系维持适宜 pH,月桂基硫酸钠抑制部分非目标菌,使大肠菌群在培养体系中获得相对生长优势。

需要注意的是,LST 肉汤中的浑浊和产气通常作为大肠菌群初筛阳性信号,但不能单独作为最终确认结果。对于大肠菌群、粪大肠菌群或大肠埃希氏菌的检测,应按照相应标准方法继续进行复发酵、确证培养或后续鉴定。

使用方法

称取本品 35.6 g,加入蒸馏水或去离子水 1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,按检测方法要求分装至含倒置小导管的试管中,于 121℃高压灭菌 15 min,冷却备用。

灭菌后应检查培养基是否澄清、颜色是否正常、倒置小导管内是否无气泡。若灭菌后小导管内残留气泡,应在使用前排除或弃用该管,以免影响产气判读。分装体积、接种量和培养温度应根据相应检测标准执行。

典型应用

LST 肉汤主要用于大肠菌群和粪大肠菌群的多管发酵法检测,也可用于大肠埃希氏菌相关检测流程中的初筛或推定试验。常见样品包括食品、水样、环境样品及相关微生物限量检测样品。

在检测过程中,若培养后肉汤出现明显浑浊,且倒置小导管中有气体产生,通常提示存在乳糖发酵产气菌。对于粪大肠菌群或大肠埃希氏菌,还需结合后续培养温度、确证培养基和生化鉴定结果进一步判断。

质量控制

下列质控菌株接种待测试培养基后,于 36℃培养 48 h,观察生长和产气情况。

质控指标 质控菌株及编号 质控评定标准
生长率 大肠埃希氏菌 ATCC 25922 混浊度 2,且气体充满管内约 1/3
生长率 弗氏柠檬酸杆菌 ATCC 43864 混浊度 2,且气体充满管内约 1/3
选择性 粪肠球菌 ATCC 29212 浑浊度 0,不生长

大肠埃希氏菌和弗氏柠檬酸杆菌均属于可用于评价培养基促生长和产气性能的质控菌株,应表现为明显浑浊并产气。粪肠球菌为革兰氏阳性菌,在 LST 肉汤中应受到抑制,不应出现明显生长。

若大肠埃希氏菌或弗氏柠檬酸杆菌生长不良、产气不足,应检查培养基称量、溶解、灭菌条件、pH、乳糖质量、倒置小导管状态、培养温度和菌株活性。若粪肠球菌明显生长,则可能提示月桂基硫酸钠选择性不足、配制浓度错误或培养基储存条件不当。

使用注意事项

LST 肉汤属于选择性液体培养基,适合用于多管发酵法初筛,不适合直接用于分离单个菌落。出现浑浊和产气的阳性管,应根据检测目的继续进行确证试验,不能仅凭 LST 结果作最终判定。

配制过程中应确保干粉完全溶解,倒置小导管内不得残留气泡。干粉培养基使用后应立即密封,置于避光、干燥处保存,避免吸潮结块或成分降解。配制后的培养基应按实验室规定条件保存,并在验证有效期内使用。若培养基出现污染、颜色异常、沉淀明显或小导管异常,不宜用于正式检测。

总体而言,月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LST)通过“胰蛋白胨营养支持、乳糖发酵产气、磷酸盐缓冲和月桂基硫酸钠选择性抑菌”的组合设计,适用于大肠菌群和粪大肠菌群的多管发酵法测定,是相关微生物检测中常用的基础选择性增菌培养基。