GN 增菌液：革兰氏阴性肠杆菌选择性增菌培养基
- 2026-06-18 16:58:30
- 逗点生物
GN 增菌液：革兰氏阴性肠杆菌选择性增菌培养基
产品基本信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | GN 增菌液 |
| 英文名称 | Gram Negative Enrichment Broth |
| 产品货号 | GF1030 |
| 产品规格 | 250 g/瓶 |
| 产品用途 | 用于革兰氏阴性肠杆菌，特别是志贺氏菌、变形杆菌的增菌培养 |
| 参考方法 | GB、SN 等相关标准 |
| 保质期 | 三年 |
配方组成、用量、作用及用途
| 成分 | 用量（g/L） | 主要作用 | 用途说明 |
|---|---|---|---|
| 胰蛋白胨 | 20.0 | 提供氮源、氨基酸、短肽、维生素及部分碳源 | 支持志贺氏菌、沙门氏菌、变形杆菌及其他肠杆菌科细菌生长 |
| 葡萄糖 | 1.0 | 易利用糖类 | 为细菌早期生长提供快速碳源，促进受损或低水平目标菌恢复增殖 |
| 甘露醇 | 2.0 | 可利用糖醇类碳源 | 为部分肠杆菌提供补充碳源，有助于提高增菌效果 |
| 柠檬酸钠 | 5.0 | 选择性抑制与螯合作用 | 抑制部分革兰氏阳性菌及背景菌，同时调节培养体系离子环境 |
| 去氧胆酸钠 | 0.5 | 胆盐类选择性抑制剂 | 抑制革兰氏阳性菌及部分胆盐敏感菌，增强对肠道革兰氏阴性菌的选择性 |
| 磷酸氢二钾 | 4.0 | 缓冲盐组分 | 与磷酸二氢钾共同构成缓冲体系，维持培养基 pH 稳定 |
| 磷酸二氢钾 | 1.5 | 缓冲盐组分 | 减轻糖类代谢产酸造成的 pH 波动，保证目标菌持续生长 |
| 氯化钠 | 5.0 | 维持渗透压 | 保持细菌细胞正常生理状态，维持培养体系稳定 |
| 最终 pH（25℃） | 7.0 ± 0.2 | 提供适宜生长环境 | 有利于革兰氏阴性肠杆菌增菌和选择性稳定发挥 |
检验原理
GN 增菌液的核心作用是选择性促进革兰氏阴性肠杆菌增殖，同时抑制部分背景菌。胰蛋白胨为目标菌提供氮源和生长因子，葡萄糖、甘露醇作为碳源促进细胞增殖。由于增菌过程中糖类代谢可能产生酸性产物，磷酸氢二钾和磷酸二氢钾组成的缓冲体系可维持培养基 pH 稳定，避免 pH 剧烈下降影响目标菌恢复和生长。
选择性主要来自柠檬酸钠和去氧胆酸钠。去氧胆酸钠属于胆盐类物质，对许多革兰氏阳性菌有抑制作用，而志贺氏菌、沙门氏菌、变形杆菌等肠道革兰氏阴性菌通常对低浓度胆盐有一定耐受性。柠檬酸钠也可通过改变离子环境和抑制部分背景菌，增强培养基选择性。
需要注意的是，GN 增菌液用于增菌培养，并不能直接完成目标菌确认。培养后仍需根据检测目的转接至相应选择性分离培养基，并结合菌落形态、生化反应、血清学或分子方法进行确证。
使用方法
称取本品 39.0 g，加入蒸馏水或去离子水 1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，按每瓶 225 mL 分装，于 115℃高压灭菌 15 min，冷却备用。
GN 增菌液中含有去氧胆酸钠等选择性成分，配制时应避免过度加热或长时间高温处理，以免影响选择性和促生长性能。灭菌后培养基应澄清或基本澄清，无污染、异常沉淀或明显颜色异常。使用前应检查培养基状态，并按相应标准方法确定样品接种量、培养温度和培养时间。
典型应用
GN 增菌液主要用于志贺氏菌、变形杆菌及其他革兰氏阴性肠杆菌的增菌培养。在检测流程中，通常用于样品前处理后的选择性增菌阶段，使目标菌数量增加，再转接至 XLD、SS、HE 或其他适用的选择性分离培养基进行分离。
对于志贺氏菌检测，增菌时间和选择压力控制尤为重要。志贺氏菌相对较为敏感，过强选择性、过长培养时间或背景菌竞争过强都可能影响检出。因此，实际操作中应严格按照标准方法控制培养时间、温度和转接步骤。
质量控制
下列质控菌株接种待测试培养基后，于 36℃培养 8 h，观察增菌效果和选择性表现。
| 质控指标 | 质控菌株及编号 | 质控评定标准 |
|---|---|---|
| 生长率 | 福氏志贺氏菌 CMCC（B）51572 | 转接至分离培养基后应有目标菌生长；产品资料描述为在 XLD 上 ＞10 CFU，菌落呈绿-蓝色 |
| 选择性 | 粪肠球菌 ATCC 29212 | 转接至 TSA 后 ＜100 CFU，生长应受到抑制 |
需说明的是，志贺氏菌在常规 XLD 琼脂上的典型菌落多为红色、淡红色或无色透明菌落，通常无黑心；“绿-蓝色”并非常规 XLD 的典型描述，可能与特定内控方法、培养基类型或记录表述有关。实际质量控制判读应以产品随货说明书、企业验证方法和所采用的标准培养基为准。
若福氏志贺氏菌增菌后回收率偏低，应检查培养基称量、灭菌温度、pH、培养时间、菌株活性、接种量以及分离培养基状态。若粪肠球菌在 TSA 上回收数量过高，则可能提示选择性不足、去氧胆酸钠作用下降或配制储存条件不当。
使用注意事项
GN 增菌液为选择性液体增菌培养基，不适合作为普通细菌通用增菌液，也不能用于最终鉴定。培养后应及时转接至相应选择性分离培养基，避免培养时间过长导致背景菌过度增殖或目标菌竞争劣势。
干粉培养基使用后应立即密封，置于避光、干燥处保存，避免吸潮、结块或成分降解。配制后的培养基应按实验室规定条件保存，并在验证有效期内使用。若出现污染、异常沉淀、颜色异常或容器破损，不宜用于正式检测。
总体而言，GN 增菌液通过营养支持、糖类补充、胆盐选择和磷酸盐缓冲体系相结合，可用于革兰氏阴性肠杆菌，特别是志贺氏菌、变形杆菌等目标菌的选择性增菌培养，是相关食品和检验标准流程中的重要增菌培养基之一。
