EC 肉汤:粪大肠菌群与大肠埃希氏菌检测常用选择性培养基

2026-06-18 17:01:40
逗点生物
简介

EC 肉汤:粪大肠菌群与大肠埃希氏菌检测常用选择性培养基

产品基本信息

项目 内容
产品名称 EC 肉汤
英文名称 EC Broth / E. coli Broth
产品货号 GF1031
产品规格 250 g/瓶
产品用途 用于粪大肠菌群、大肠埃希氏菌的检测
参考方法 FDA BAM、GB、SN 等相关标准
保质期 三年

配方组成、用量、作用及用途

成分 用量(g/L) 主要作用 用途说明
胰蛋白胨 20.0 提供氮源、氨基酸、短肽及部分碳源 支持大肠埃希氏菌、粪大肠菌群等目标菌生长
3号胆盐 1.5 选择性抑制剂 抑制部分革兰氏阳性菌,尤其是部分革兰氏阳性杆菌和粪肠球菌,提高目标菌选择性
乳糖 5.0 可发酵糖类 作为大肠菌群发酵产酸、产气的底物,是判读产气反应的重要基础
磷酸氢二钾 4.0 缓冲盐组分 与磷酸二氢钾共同维持培养基 pH 稳定,减少发酵产酸造成的 pH 剧烈波动
磷酸二氢钾 1.5 缓冲盐组分 参与磷酸盐缓冲体系,维持适宜的生长和发酵环境
氯化钠 5.0 维持渗透压 保持细菌细胞正常生理状态,保证培养体系稳定
最终 pH(25℃) 6.9 ± 0.2 提供适宜培养环境 有利于目标菌生长、乳糖发酵和产气反应稳定表现

检验原理

EC 肉汤主要用于粪大肠菌群和大肠埃希氏菌检测流程中的确证或选择性培养步骤。大肠埃希氏菌通常能够在含胆盐的环境中生长,并发酵乳糖产生酸和气体。检测时培养基常配合倒置小导管使用,若培养后肉汤出现明显浑浊,并且小导管内有气体产生,则提示目标菌可能存在。

培养温度也是 EC 肉汤选择性的重要组成部分。粪大肠菌群和大肠埃希氏菌通常可在较高温度下生长并产气,而许多非粪源性或对温度较敏感的背景菌生长会受到限制。产品资料中质控条件为 44.5℃培养 48 h,这一条件有助于提高对粪大肠菌群的选择性。

需要注意的是,EC 肉汤中的浑浊和产气是重要的推定或确证信号,但不能单独替代完整鉴定流程。实际检测中,应根据相应标准方法,结合后续分离培养、生化鉴定或其他确证试验进行综合判断。

使用方法

称取本品 37.0 g,加入蒸馏水或去离子水 1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,按检测方法要求分装至含倒置小导管的试管中,于 121℃高压灭菌 15 min,冷却后备用。

灭菌后应检查培养基状态。正常培养基应澄清或基本澄清,无污染、异常沉淀或明显颜色异常。倒置小导管内不应有残留气泡,否则会影响产气结果判读。若发现小导管内已有气泡,应排除后使用,无法排除时建议弃用该管。

典型应用

EC 肉汤常用于大肠菌群检测流程中,对粪大肠菌群或大肠埃希氏菌进行进一步确认。样品经前处理或推定试验后,可转接至 EC 肉汤,在规定温度下培养,观察是否生长和产气。

在食品、水样、环境样品及相关产品检测中,EC 肉汤常作为判断粪便污染指示菌的重要培养基之一。若培养后出现浑浊并产气,应按照相应标准方法继续开展后续确证步骤;若无浑浊、无产气,则通常提示在该条件下未检出符合条件的目标菌。

质量控制

下列质控菌株接种待测试培养基后,于 44.5℃培养 48 h,观察生长和产气情况。

质控指标 质控菌株及编号 质控评定标准
生长率 大肠埃希氏菌 ATCC 25922 浑浊度 2,且气体充满管内约 1/3
选择性 粪肠球菌 ATCC 29212 浑浊度 0,不生长

大肠埃希氏菌应表现为明显生长并产气,说明培养基具有合格的促生长和乳糖发酵支持能力。粪肠球菌作为革兰氏阳性受抑制菌株,应不生长,说明培养基的胆盐选择性和培养条件能够有效抑制非目标菌。

若大肠埃希氏菌生长不良或产气不足,应检查培养基称量、溶解、灭菌条件、pH、乳糖质量、胆盐活性、培养温度、倒置小导管状态、菌株活性和接种量。若粪肠球菌出现明显生长,则可能与胆盐选择性不足、培养基配制错误、培养温度偏低或储存条件不当有关。

使用注意事项

EC 肉汤为选择性液体培养基,适合用于粪大肠菌群和大肠埃希氏菌检测流程中的增菌或确证步骤,不能用于直接分离单个菌落,也不能仅凭肉汤浑浊作最终判定。产气结果应结合倒置小导管观察,并按照标准方法进行后续确认。

配制过程中应确保干粉完全溶解,分装时应正确放置倒置小导管,灭菌后小导管内不得残留气泡。干粉培养基使用后应立即密封,置于避光、干燥处保存,防止吸潮、结块或成分降解。配制好的培养基应按实验室规定条件保存,并在验证有效期内使用。

总体而言,EC 肉汤通过胰蛋白胨提供营养,胆盐增强选择性,乳糖提供发酵产气底物,并配合较高培养温度筛选耐热大肠菌群,是粪大肠菌群和大肠埃希氏菌检测中常用而重要的选择性液体培养基。