含 0.6% 酵母浸膏的胰酪胨大豆琼脂：李斯特氏菌纯培养常用基础培养基

产品基本信息

项目	内容
产品名称	含 0.6% 酵母浸膏的胰酪胨大豆琼脂
英文名称	Tryptic Soy Agar with 0.6% Yeast Extract
产品货号	GF1043
产品规格	250 g/瓶
产品用途	用于李斯特氏菌的培养、纯化和传代
配方依据	GB 4789.30-2016
参考方法	GB、FDA BAM、ISO、SN 等相关标准
保质期	三年

成分	用量（g/L）	主要作用	用途说明
胰胨	17.0	提供氮源、氨基酸、短肽及部分碳源	作为主要营养来源，支持李斯特氏菌生长、复苏和纯培养
多价胨	3.0	提供复合氮源、肽类和生长促进物质	与胰胨形成营养互补，提高培养基促生长能力
酵母膏粉	6.0	提供 B 族维生素、氨基酸、核苷酸和生长因子	增强对李斯特氏菌及受损细胞的营养支持，有利于菌落形成
氯化钠	5.0	维持渗透压	保持细菌细胞正常生理状态，维持培养体系稳定
磷酸氢二钾	2.5	缓冲剂	维持培养基 pH 相对稳定，减少代谢产物引起的酸碱波动
葡萄糖	2.5	易利用碳源	为细菌早期生长提供能量来源，促进菌落发育
琼脂	15.0	凝固剂	形成固体平板，便于单菌落分离、纯化和观察
最终 pH（25℃）	7.2 ± 0.2	提供适宜培养环境	有利于李斯特氏菌生长及培养基性能稳定

TSA-YE 的核心作用是为李斯特氏菌提供均衡而丰富的营养环境。胰胨和多价胨提供氨基酸、短肽和氮源，酵母膏粉提供维生素、核苷酸和多种生长因子，可促进李斯特氏菌在纯化培养阶段形成良好菌落。

葡萄糖作为易利用碳源，可为细菌早期代谢提供能量；磷酸氢二钾具有缓冲作用，可减轻培养过程中 pH 波动；氯化钠维持适宜渗透压；琼脂用于形成稳定的固体培养基表面，便于菌落分离和观察。

在李斯特氏菌检测流程中，TSA-YE 常用于从选择性分离平板上挑取疑似菌落后的纯化培养。获得纯培养物后，可进一步进行溶血试验、动力试验、生化鉴定、血清学或分子生物学确证。因此，TSA-YE 不是最终鉴定培养基，而是连接“疑似菌落筛选”和“后续确证试验”的重要基础培养基。

称取本品 51.0 g，加入蒸馏水或去离子水 1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，按使用需要分装后，于 121℃高压灭菌 15 min。灭菌后冷却至约 45～50℃，倾注平板；也可根据实验需要制备斜面或其他形式的固体培养基。

配制时应确保干粉完全溶解，避免琼脂未充分溶解导致平板凝胶不均。倾注平板时应注意无菌操作，平板表面应平整、无污染、无明显气泡和大量冷凝水。制备后的平板应按实验室验证条件保存，并在规定有效期内使用。

TSA-YE 主要用于李斯特氏菌的纯培养和传代。在实际检测中，疑似李斯特氏菌菌落通常先在 PALCAM、Oxford、显色培养基或其他选择性分离培养基上形成，再挑取至 TSA-YE 平板进行纯化。纯化后的菌落可用于革兰氏染色、触酶试验、溶血试验、糖发酵试验、运动性观察或其他确证鉴定。

由于培养基本身无选择性，若直接接种复杂样品，背景菌也可能生长。因此，在食品、环境或原料样品检测中，TSA-YE 一般不作为初筛选择性分离培养基，而是用于标准流程中的纯培养环节。

下列质控菌株接种后，于 36℃±1℃培养 18～24 h，观察生长情况。

指标	质控菌株及编号	质检评定标准
生长率	单核细胞增生李斯特氏菌 ATCC 19115	PR ≥ 0.7

PR 值用于评价培养基对目标菌的促生长能力。单核细胞增生李斯特氏菌在本培养基上应生长良好，形成可观察菌落，说明培养基营养组成和制备状态符合使用要求。

若生长率低于要求，应检查培养基称量、溶解、灭菌条件、pH、琼脂凝胶状态、平板储存时间、干粉保存状态、菌株活性及接种量。若平板出现污染、干裂、明显析水或凝胶异常，也可能影响质控结果和实际检测可靠性。

TSA-YE 为营养型固体培养基，不含选择性抑菌剂，不能替代 PALCAM、Oxford、李斯特氏菌显色培养基等选择性分离培养基，也不能单独作为单核细胞增生李斯特氏菌最终鉴定依据。疑似菌株仍需按照相关标准方法进行后续确证。

干粉培养基使用后应立即密封，置于避光、干燥处保存，避免吸潮、结块或成分变化。配制后的平板应避光、冷藏保存，并在验证有效期内使用。使用前应检查平板状态，如出现污染、明显水汽、干裂、颜色异常或凝胶结构异常，不宜用于正式检测。

总体而言，含 0.6% 酵母浸膏的胰酪胨大豆琼脂通过胰胨、多价胨、酵母膏粉、葡萄糖和缓冲体系提供丰富稳定的营养环境，适用于李斯特氏菌的纯培养、传代和后续鉴定前准备，是李斯特氏菌标准检测流程中的常用基础培养基之一。