假单胞菌 CFC 选择性培养基基础:铜绿假单胞菌选择性分离培养基
- 2026-06-18 17:40:16
- 逗点生物
假单胞菌 CFC 选择性培养基基础:铜绿假单胞菌选择性分离培养基
产品基本信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | 假单胞菌 CFC 选择性培养基基础 |
| 英文名称 | Pseudomonas CFC Selective Medium Base |
| 产品货号 | GF1044 |
| 产品规格 | 250 g/瓶 |
| 产品用途 | 用于进出口食品中铜绿假单胞菌的选择性分离培养 |
| 参考方法 | SN 标准 |
| 保质期 | 三年 |
配方组成、用量、作用及用途
| 成分 | 用量(g/L) | 主要作用 | 用途说明 |
|---|---|---|---|
| 蛋白胨 | 20.0 | 提供氮源、氨基酸、短肽、维生素及生长因子 | 支持铜绿假单胞菌生长和菌落形成 |
| 硫酸钾 | 10.0 | 提供无机盐,促进色素产生 | 与镁盐共同有助于铜绿假单胞菌色素表达,便于菌落观察 |
| 氯化镁 | 1.4 | 提供镁离子,参与酶活性和代谢调节 | 有助于铜绿假单胞菌生长及色素形成;灭菌后可能出现微量沉淀 |
| 十六烷三甲基溴化铵 | 0.3 | 选择性抑制剂 | 抑制多数非目标菌,增强铜绿假单胞菌选择性分离效果 |
| 甘油 | 每 1 L 培养基加入 10 mL | 碳源 | 为铜绿假单胞菌提供可利用碳源,并有助于色素产生 |
| 配套试剂 TJ031 | 每 100 mL 基础培养基加入 1 支 | 选择性抗菌成分 | 通常含头孢菌素、夫西地酸等抑菌剂,用于抑制非目标菌生长 |
| 琼脂 | 13.6 | 凝固剂 | 形成固体平板,便于菌落分离、观察和挑取 |
| 最终 pH(25℃) | 7.2 ± 0.2 | 提供适宜培养环境 | 有利于铜绿假单胞菌生长、色素产生及选择性稳定发挥 |
培养基原理
CFC 培养基的核心原理是营养支持、色素促进和选择性抑菌。铜绿假单胞菌可利用蛋白胨和甘油生长,在适宜条件下产生绿色、黄绿色或蓝绿色色素。培养基中的硫酸钾和镁盐有助于促进色素产生,使典型菌落更易识别。
选择性方面,十六烷三甲基溴化铵是一种阳离子表面活性剂,对多种非目标菌具有抑制作用。配套试剂中的头孢菌素和夫西地酸等抗菌成分可进一步抑制部分革兰氏阳性菌及其他背景菌,从而提高铜绿假单胞菌的分离机会。
需要注意的是,铜绿假单胞菌的色素产生受菌株差异、培养温度、培养时间、氧气条件和培养基状态影响。部分菌株色素不典型,部分非目标假单胞菌也可能产生相似色素。因此,CFC 平板上的绿色或蓝绿色菌落只能作为疑似结果,最终仍需结合氧化酶试验、生化鉴定、色素试验或分子方法进行确证。
使用方法
称取本品 45.3 g,加入蒸馏水或去离子水 1 L,再加入 10 mL 甘油,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装后于 121℃高压灭菌 15 min。灭菌后冷却至约 50℃,每 100 mL 培养基基础加入 1 支配套试剂 TJ031,摇匀后倾注平板备用。
加入配套试剂后不宜再次高压灭菌,以免影响抗生素活性。配制时应充分混匀,避免选择性试剂分布不均。由于培养基中含有少量氯化镁,灭菌后可能出现微量沉淀,一般不影响使用;但若出现大量沉淀、明显浑浊、污染或颜色异常,则不宜用于正式检测。
典型应用
假单胞菌 CFC 选择性培养基基础主要用于进出口食品及相关样品中铜绿假单胞菌的选择性分离培养。样品经前处理或增菌后,可接种于 CFC 平板,在规定温度下培养,观察是否形成疑似铜绿假单胞菌菌落。
典型铜绿假单胞菌在该培养基上通常生长良好,可产生绿色、黄绿色或蓝绿色色素。若出现疑似菌落,应挑取进行纯化和后续确证。由于不同菌株的色素产生能力存在差异,实际判读时不应只依赖颜色,还应结合菌落形态、氧化酶反应和标准方法要求的确认步骤。
质量控制
接种以下质控菌株后,于 36±1℃需氧培养 18~24 h,观察生长和菌落特征。
| 质控指标 | 质控菌株及编号 | 质控评定标准 |
|---|---|---|
| 生长率 | 铜绿假单胞菌 ATCC 27853 | PR ≥ 0.7,产绿色色素 |
| 选择性 | 大肠埃希氏菌 ATCC 25922 | G ≤ 1,生长应受到明显抑制 |
铜绿假单胞菌 ATCC 27853 应在培养基上生长良好并产生绿色色素,说明培养基具有合格的促生长能力和色素表现能力。大肠埃希氏菌 ATCC 25922 应受到明显抑制,说明培养基选择性有效。
若铜绿假单胞菌生长不良或色素不明显,应检查培养基称量、甘油添加量、灭菌条件、pH、配套试剂加入温度、平板储存状态、菌株活性和培养条件。若大肠埃希氏菌生长明显,则可能提示选择性添加剂失效、加入量不足、培养基配制错误或储存条件不当。
使用注意事项
本产品为培养基基础,使用时必须加入甘油和配套选择性试剂。基础培养基经高压灭菌后,应冷却至约 50℃再加入 TJ031,加入后应充分混匀并尽快倾注平板。含抗生素的培养基不宜再次高压灭菌,也不宜长时间高温放置。
配制好的平板应颜色均匀、表面平整,无污染、干裂、大量析水或异常沉淀。培养基中因氯化镁形成的微量沉淀通常可以接受,但若沉淀严重影响菌落观察,应重新评估配制过程和原料状态。
CFC 培养基用于选择性分离和疑似筛选,不能单独作为铜绿假单胞菌最终鉴定依据。疑似菌落需按照 SN 标准或实验室确认程序进行后续纯化、氧化酶试验、生化鉴定或其他确证试验。
总体而言,假单胞菌 CFC 选择性培养基基础通过蛋白胨和甘油提供营养,硫酸钾和镁盐促进色素表现,并结合十六烷三甲基溴化铵和配套抗生素抑制非目标菌,可用于铜绿假单胞菌的选择性分离培养,是相关食品微生物检测流程中的重要培养基之一。




