血琼脂基础：营养要求较高细菌培养与溶血试验常用培养基

产品基本信息

成分	用量（g/L）	主要作用	用途说明
蛋白胨	10.0	提供氮源、氨基酸、短肽及部分碳源	支持多数细菌基础生长，为营养要求较高菌株提供营养基础
牛肉膏	3.0	提供碳源、氮源、维生素、矿物质和生长因子	补充复杂营养成分，提高培养基促生长能力
氯化钠	5.0	维持渗透压	保持细菌细胞正常生理状态，维持培养体系稳定
琼脂	15.0	凝固剂	形成固体平板，便于菌落分离、观察和挑取
新鲜无菌脱纤维羊血	每 100 mL 基础培养基加入 5～10 mL	提供红细胞、血红蛋白及部分生长因子	促进部分营养要求较高细菌生长，并用于观察 α、β 或 γ 溶血现象

血琼脂基础中的蛋白胨和牛肉膏为细菌提供氨基酸、肽类、维生素和矿物质等营养物质，氯化钠维持适宜渗透压，琼脂使培养基形成稳定固体表面。加入脱纤维羊血后，培养基营养更丰富，可支持部分营养要求较高的细菌生长。

溶血试验的核心是观察细菌对红细胞的作用。不同细菌产生的溶血素或相关酶类不同，因此在血琼脂平板上可表现为不同溶血类型：

β 溶血：红细胞完全破坏，菌落周围形成透明溶血环，金黄色葡萄球菌常见此类表现；
α 溶血：红细胞部分破坏，菌落周围出现草绿色或暗绿色变色区，肺炎链球菌常见此类表现；
γ 溶血：无明显溶血，菌落周围培养基基本不变。

溶血表现受菌株特性、羊血质量、平板厚度、培养温度、培养时间和气体环境等因素影响，因此应结合标准操作条件和质控菌株进行判读。

称取本品 33.0 g，加入蒸馏水或去离子水 1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装后于 121℃高压灭菌 15 min。灭菌后冷却至约 50℃，每 100 mL 基础培养基以无菌操作加入 新鲜无菌脱纤维羊血 5～10 mL，轻轻摇匀，倾注平板备用。

加入羊血时温度控制十分重要。温度过高可能导致红细胞破裂，使培养基颜色变暗并影响溶血环观察；温度过低则可能导致琼脂提前凝固，使血液分布不均。加入羊血后应轻轻混匀，避免剧烈振摇产生气泡或造成红细胞机械性破坏。

血琼脂平板常用于营养要求较高细菌的培养、菌落形态观察和溶血类型判读。例如，金黄色葡萄球菌在适宜条件下可形成 β 溶血环，肺炎链球菌可形成 α 溶血环。对于临床、食品、药品或环境样品中的疑似菌株，血琼脂可作为后续纯化培养和辅助鉴别培养基。

需要强调的是，血琼脂不是强选择性培养基，许多细菌均可在其上生长。因此，在复杂样品检测中，血琼脂通常需要与选择性培养基、显色培养基、生化鉴定或分子检测等方法配合使用。

下列质控菌株接种后，于 36℃培养 24 h，观察溶血特征。

质控指标	质控菌株及编号	质控评定标准
特异性	金黄色葡萄球菌 ATCC 6538	菌落周围有 β 溶血环
特异性	肺炎链球菌 CMCC（B）33412	菌落周围有 α 溶血环

金黄色葡萄球菌出现清晰 β 溶血环，说明培养基能够显示完全溶血反应；肺炎链球菌出现 α 溶血环，说明培养基能够支持其生长并显示部分溶血反应。若质控菌株生长不良或溶血环不典型，应检查基础培养基配制、灭菌条件、pH、羊血质量、加血温度、平板保存状态、培养条件和菌株活性。

血琼脂基础必须加入合格的新鲜无菌脱纤维羊血后，才可用于溶血试验。羊血应无污染、无明显自溶或溶血背景，加入后平板应呈均匀红色或暗红色。若平板出现凝块、明显气泡、大量析水、颜色异常、污染或干裂，不宜用于正式检测。

配制好的血琼脂平板应避光、冷藏保存，并在实验室验证有效期内使用。溶血结果容易受到培养条件影响，因此不同批次平板、不同羊血来源或不同培养时间下的结果应结合质控菌株进行确认。

血琼脂可用于培养和溶血观察，但不能单独完成细菌最终鉴定。疑似菌株仍需结合革兰染色、触酶试验、凝固酶试验、生化鉴定、血清学或分子方法进行综合判断。

总体而言，血琼脂基础通过蛋白胨、牛肉膏和氯化钠提供基础营养，并在加入脱纤维羊血后支持营养要求较高细菌生长和溶血类型观察，是微生物检测中常用且重要的基础培养基之一。