乳糖胆盐发酵培养基：大肠菌群与粪大肠菌群测定常用培养基

产品基本信息

项目	内容
产品名称	乳糖胆盐发酵培养基
英文名称	Lactose Bile Fermentation Broth
产品货号	GF1051
产品规格	250 g/瓶
产品用途	用于大肠菌群、粪大肠菌群的测定
参考方法	GB 标准
保质期	三年

成分	用量（g/L，单料）	主要作用	用途说明
蛋白胨	20.0	提供氮源、氨基酸、短肽及部分碳源	支持大肠菌群等目标菌生长和恢复
牛胆盐	5.0	选择性抑制剂	抑制部分革兰氏阳性菌和非肠道背景菌，提高大肠菌群检测选择性
乳糖	10.0	可发酵糖类	大肠菌群发酵乳糖产酸、产气，是结果判读的关键底物
溴甲酚紫	0.01	pH 指示剂	酸性条件下由紫色转为黄色，用于显示乳糖发酵产酸反应
最终 pH（25℃）	7.4 ± 0.2	提供适宜培养环境	有利于目标菌生长、产酸产气及指示剂稳定表现

乳糖胆盐发酵培养基的核心判读依据是乳糖发酵产酸和产气。大肠菌群通常能够发酵乳糖，产生酸性代谢产物，并在发酵过程中产生气体。酸的生成会使溴甲酚紫由紫色转为黄色；气体则聚集在倒置小导管中，形成可见气泡或气体柱。

牛胆盐是培养基中的选择性成分，可抑制部分革兰氏阳性菌和非目标菌。由于大肠菌群属于肠道相关革兰氏阴性菌，对一定浓度胆盐具有相对耐受性，因此可在该培养基中生长并表现乳糖发酵反应。

需要注意的是，培养液浑浊、变黄并产气通常提示大肠菌群推定阳性，但并不能单独完成最终鉴定。对于粪大肠菌群或特定目标菌的判定，还需按照 GB 标准规定的温度、时间及后续确证步骤进行。

称取本品 35.0 g（单料） 或 70.0 g（双料），加入蒸馏水或去离子水 1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装于带有倒置小导管的试管中，于 115℃高压灭菌 20 min，冷却后备用。

分装时应确保倒置小导管完全浸没于培养液中，灭菌后小导管内不应残留气泡，否则会影响产气结果判读。若灭菌后发现小导管内已有气泡，应排除后使用；无法排除时不宜用于正式检测。

接种后按标准方法培养，通常从培养液浑浊度、颜色变化和倒置小导管产气情况进行观察。

对于大肠菌群检测，通常以产酸产气并伴随生长作为重要判读依据。若仅有浑浊而无产气，或仅有颜色轻微变化，应结合标准方法要求和后续复验或确证步骤判断。

下列质控菌株接种待测试培养基后，于 35～37℃培养 24 h，观察生长、产酸和产气情况。

质控指标	质控菌株及编号	质控评定标准
生长率	大肠埃希氏菌 CMCC（B）44102	浑浊度 2，气体充满管内约 1/3，产酸、产气且培养液混浊
选择性	金黄色葡萄球菌 CMCC（B）26003	浑浊度 0，培养液澄清，不产气

大肠埃希氏菌应表现为明显生长、产酸和产气，说明培养基的促生长能力、乳糖发酵系统和倒置小导管判读体系正常。金黄色葡萄球菌应不生长或明显受抑制，说明牛胆盐选择性符合要求。

若大肠埃希氏菌产气不足或培养液不变色，应检查培养基称量、灭菌温度、pH、乳糖质量、指示剂状态、倒置小导管设置、菌株活性、接种量和培养条件。若金黄色葡萄球菌出现明显生长，则可能提示胆盐选择性不足、培养基配制错误、灭菌条件不当或储存条件异常。

乳糖胆盐发酵培养基为液体发酵培养基，不适合直接观察单菌落，也不能单独作为大肠菌群最终鉴定依据。检测中应严格按照 GB 标准要求进行接种、培养和确证试验。

培养基分装时必须配合倒置小导管使用，并确保灭菌后小导管内无预存气体。培养过程中若出现产气，应结合培养液浑浊和变色情况综合判断。对于可疑结果，应按标准方法进行复发酵、转种或进一步确证。

干粉培养基使用后应立即密封，置于避光、干燥处保存，避免吸潮、结块或成分变化。配制后的培养基应按实验室验证条件保存，并在规定有效期内使用。若出现污染、明显沉淀、颜色异常、pH 偏差较大或小导管异常，不宜用于正式检测。

总体而言，乳糖胆盐发酵培养基通过蛋白胨提供营养、牛胆盐增强选择性、乳糖提供发酵底物、溴甲酚紫显示产酸反应，并配合倒置小导管观察产气，是大肠菌群和粪大肠菌群测定中常用的重要发酵培养基之一。