半固体琼脂：细菌动力观察、菌种保存与 H 抗原位相变异试验常用培养基

产品基本信息

配方组成、用量、作用及用途

检验原理

半固体琼脂的动力观察原理基于细菌在低浓度琼脂中的运动扩散能力。具有鞭毛运动能力的细菌接种后，可从穿刺线向四周扩散，使培养基出现弥散性混浊；无动力菌则通常局限于穿刺线及其附近生长，形成清晰的线状生长痕迹。

蛋白胨和牛肉浸粉提供细菌生长所需营养，氯化钠维持渗透压，琼脂浓度较低，使培养基既能保持一定形态，又允许有动力细菌在其中移动。若琼脂浓度过高，可能限制细菌运动；若琼脂浓度过低，则培养基成型差，影响穿刺和结果观察。

动力试验受培养温度、培养时间、菌株状态、接种方式和培养基软硬度影响较大。例如，小肠结肠炎耶尔森氏菌常表现为 26℃有动力、36℃无动力或动力明显减弱，因此该类菌株的动力结果必须结合规定温度进行判断。

使用方法

称取本品 22.0 g，加入蒸馏水或去离子水 1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装小试管后，于 121℃高压灭菌 15 min。灭菌后直立放置，使培养基在试管中凝固备用。

使用时通常采用无菌接种针进行直线穿刺接种，穿刺应尽量沿试管中心垂直向下，避免接种针左右晃动造成假性扩散。培养后观察穿刺线周围是否出现弥散性生长，以判断菌株动力特征。

典型结果判读

半固体琼脂的结果主要通过穿刺线周围的生长形态进行判断。

需要注意的是，动力阴性并不一定代表菌株永久无鞭毛或无运动能力，也可能与培养温度不适、培养时间不足、菌龄过老或培养基状态异常有关。因此，对于温度敏感型菌株，应按标准要求设置相应培养温度。

典型应用

半固体琼脂可用于细菌动力观察试验，是鉴别肠杆菌科及其他细菌的重要基础试验之一。大肠埃希氏菌等有动力菌常表现为扩散生长，志贺氏菌通常无动力，多沿穿刺线生长。小肠结肠炎耶尔森氏菌具有温度依赖性动力特征，在较低温度下可表现为有动力，而在 36℃左右常表现为无动力或动力减弱。

除动力观察外，半固体琼脂也可用于部分菌种的短期保存。软凝胶状态可减少培养物干燥，有利于维持菌株活性。但对于长期保藏，不建议仅依赖半固体琼脂，应采用冻干、甘油冷冻或标准菌种保藏方法。

在 H 抗原位相变异试验中，半固体环境可帮助具有运动能力的菌株迁移扩散，用于相关血清学或位相变异观察。具体操作应按照 GB、SN 或实验室标准方法执行。

质量控制

下列质控菌株接种后，于规定条件下培养，观察动力表现。

大肠埃希氏菌应表现为明显扩散生长，说明培养基软硬度和营养条件能够支持动力观察。福氏志贺氏菌应沿穿刺线生长，作为无动力对照。小肠结肠炎耶尔森氏菌应体现温度依赖性动力特征，26℃有动力，36℃无动力或明显不扩散。

若有动力菌不扩散，应检查琼脂浓度、培养基凝胶硬度、pH、培养温度、菌株活性、菌龄和接种方式。若无动力菌出现明显扩散，应排查穿刺操作是否偏斜、接种量是否过大、培养基过软、污染或菌株误用等问题。

使用注意事项

半固体琼脂用于动力观察时，应尽量采用直线穿刺接种，避免接种针摆动造成机械性扩散。接种量不宜过大，否则可能使穿刺线周围出现非运动性浑浊，影响判读。

培养基应直立凝固，凝固后质地应均匀，无气泡、裂纹、污染或明显析水。若培养基过硬，可能抑制有动力菌扩散；若过软或未完全凝固，则容易造成假阳性扩散。配制时应确保琼脂充分溶解，并按规定灭菌和保存。

动力试验结果应结合培养温度和菌株特性判断。对于小肠结肠炎耶尔森氏菌等温度敏感菌株，应按规定分别在不同温度下观察。半固体琼脂可用于短期保存菌种，但不能替代长期标准保藏方法。

总体而言，半固体琼脂通过蛋白胨和牛肉浸粉提供基础营养，以较低浓度琼脂形成软凝胶结构，可用于观察细菌动力、辅助菌种保存及 H 抗原位相变异试验，是微生物鉴定和菌种操作中常用的基础培养基之一。