绿脓菌素测定用培养基：铜绿假单胞菌色素鉴别的重要培养基
- 2026-06-22 11:46:53
- 逗点生物
绿脓菌素测定用培养基：铜绿假单胞菌色素鉴别的重要培养基
产品信息与用途
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | 绿脓菌素测定用培养基 |
| 英文名称 | Pyocyanin Test Medium |
| 产品货号 | GF1056 |
| 产品规格 | 250 g/瓶 |
| 保质期 | 未开封条件下三年 |
| 主要用途 | 用于铜绿假单胞菌的绿脓菌素测定 |
| 适用参考 | GB 8538-2022《食品安全国家标准 饮用天然矿泉水检验方法》；《化妆品安全技术规范》 |
配方组成及作用
| 成分 | 用量 | 主要作用 |
|---|---|---|
| 蛋白胨 | 20.0 g/L | 提供氮源、氨基酸和生长因子，支持铜绿假单胞菌生长及代谢活动 |
| 氯化镁 | 1.4 g/L | 提供镁离子，参与细胞代谢过程，有利于菌体生长和色素形成 |
| 硫酸钾 | 10.0 g/L | 提供钾离子和硫酸根，调节无机盐环境，促进绿脓菌素表达 |
| 琼脂 | 18.0 g/L | 凝固剂，使培养基形成稳定固体表面，便于观察色素扩散和培养基变色 |
| 甘油 | 10.0 g/L，使用时另加 | 作为碳源，促进铜绿假单胞菌生长和绿脓菌素产生 |
| 最终 pH | 7.4±0.2 | 提供适宜铜绿假单胞菌生长及产色素的酸碱环境 |
检验原理
铜绿假单胞菌是一类革兰氏阴性、需氧、非发酵型杆菌，具有较强的环境适应能力，在水、土壤及潮湿环境中较常见。该菌可产生多种色素，其中绿脓菌素呈蓝绿色，是铜绿假单胞菌鉴别中的重要生化特征之一。
绿脓菌素测定用培养基通过蛋白胨和甘油提供生长所需的氮源与碳源，使铜绿假单胞菌能够较好生长；氯化镁和硫酸钾提供适宜的无机盐环境，有利于绿脓菌素产生和色素表现；琼脂作为凝固剂，为菌体生长和色素扩散提供固体培养表面。接种后若铜绿假单胞菌生长良好，并使培养基出现蓝绿色或绿色变化，说明该菌株具有绿脓菌素产生能力。
需要注意的是，并非所有铜绿假单胞菌在所有条件下都会表现出同等强度的绿脓菌素反应。菌株状态、培养温度、培养时间、接种量、培养基新鲜度以及观察条件均可能影响结果。因此，实际检验中应设置阳性和阴性质控，并结合标准规定的其他确认试验综合判断。
质量控制
质控菌株接种后，于 35～37 ℃培养 24 h，观察菌株生长情况及培养基颜色变化。
| 质控指标 | 质控菌株及编号 | 质控评定标准 |
|---|---|---|
| 生化特性 | 铜绿假单胞菌 ATCC 9027 | 生长良好，培养基变绿色或蓝绿色 |
| 生化特性 | 大肠埃希氏菌 ATCC 25922 | 生长良好，培养基不变色 |
从质控结果可以看出，该培养基并非以选择性抑制大肠埃希氏菌为主要目的。大肠埃希氏菌可在培养基上生长，但通常不产生绿脓菌素，因此培养基不应出现典型蓝绿色或绿色变化。若阴性质控出现明显变色，应排查菌株污染、培养基配制错误、观察误判或交叉污染等问题。
操作与结果观察要点
配制培养基时，应按规定加入甘油。甘油是该培养基的重要碳源，漏加或加入量不足可能导致铜绿假单胞菌生长和产色素能力下降。干粉加入水后需充分搅拌并加热煮沸，使各成分完全溶解，再按要求分装灭菌。由于本培养基规定灭菌条件为 115 ℃、20 min，不宜随意提高灭菌温度或延长灭菌时间，以免影响培养基性能。
接种后应在规定温度下培养，并在规定时间内观察。典型阳性结果为菌体生长良好，培养基或菌落周围出现绿色、蓝绿色色素。若色素较弱，可适当延长观察时间，但应避免超出方法允许范围后作出不规范判定。对于结果不典型的菌株，应结合氧化酶试验、产荧光试验、乙酰胺利用试验及其他确认项目进行综合分析。
贮存、安全与废物处理
干粉培养基应密封保存于阴凉、干燥、避光处，使用后立即盖紧瓶盖，防止吸潮、结块或成分受潮失效。称量时应避免粉尘吸入，建议佩戴口罩并在通风良好的环境中操作。未开封产品在规定条件下保质期为三年；开封后实际可用期限与储存条件、取用频率和密封状态有关，应结合外观状态和质控结果判断。
本品仅用于实验室微生物检验，不得用于临床诊断。检测结束后的带菌培养物、接种工具及污染耗材，应按实验室生物安全要求处理，一般可在 121 ℃高压灭菌 30 min 后再进行废弃物处置。
参考文献
GB 8538-2022《食品安全国家标准 饮用天然矿泉水检验方法》
《化妆品安全技术规范》
