乳糖蛋白胨培养液:水中大肠菌群与大肠埃希氏菌检测用基础培养液
- 2026-06-22 16:14:10
- 逗点生物
乳糖蛋白胨培养液:水中大肠菌群与大肠埃希氏菌检测用基础培养液
产品信息与用途
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | 乳糖蛋白胨培养液 |
| 英文名称 | Lactose Peptone Broth |
| 产品货号 | GF1058 |
| 产品规格 | 250 g/瓶 |
| 保质期 | 未开封条件下三年 |
| 主要用途 | 用于饮用水、水源水中总大肠菌群、耐热大肠菌群及大肠埃希氏菌测定 |
| 适用标准 | GB 8538-2022、GB/T 5750.12-2023 |
配方组成及作用
使用时称取本品 23.0 g(单料)或 46.0 g(双料),加入蒸馏水或去离子水 1 L,加热搅拌至完全溶解后分装含倒管试管,115 ℃高压灭菌 20 min,备用。最终 pH 为 7.2±0.2(25 ℃)。
| 成分 | 用量 | 主要作用 |
|---|---|---|
| 蛋白胨 | 10.0 g/L | 提供氮源、氨基酸及肽类物质,支持细菌生长 |
| 牛肉浸粉 | 3.0 g/L | 提供维生素、矿物质及生长因子,增强营养性 |
| 乳糖 | 5.0 g/L | 可发酵糖类,用于检测乳糖发酵产酸产气能力 |
| 氯化钠 | 5.0 g/L | 维持渗透压稳定,保证细胞正常生理状态 |
| 溴甲酚紫 | 0.016 g/L | pH 指示剂,指示乳糖发酵产生的酸性变化 |
| 最终 pH | 7.2±0.2 | 提供适宜肠道菌群生长与发酵反应的环境 |
检验原理
乳糖蛋白胨培养液的检测基础是肠道菌群典型的乳糖发酵特性。大肠菌群(包括大肠埃希氏菌等)能够利用乳糖进行发酵代谢,产生酸性产物并伴随气体(二氧化碳与氢气等)生成。
培养基中的蛋白胨和牛肉浸粉提供基础营养,使受检菌能够恢复生长并进行代谢活动;乳糖作为唯一或主要可发酵碳源,用于区分乳糖发酵菌与非发酵菌;溴甲酚紫作为酸碱指示剂,在产酸时由紫色转变为黄色,从而直观反映发酵情况;氯化钠维持渗透压稳定,确保细菌代谢正常进行。
在标准检测中,通常配合杜伦发酵管使用,通过观察管内是否产生气体来判断是否为典型大肠菌群阳性反应。产酸产气同时出现是大肠埃希氏菌的重要特征之一,但最终仍需结合后续分离与确证试验进行综合判定。
质量控制
质控菌株接种后于 35~37 ℃培养 24 h,观察产酸产气情况及培养基变化。
| 质控指标 | 质控菌株及编号 | 质控评定标准 |
|---|---|---|
| 生长与发酵 | 大肠埃希氏菌 ATCC 25922 | 浑浊度 2,产酸产气,倒管气体充满约 1/3 |
| 特异性 | 鼠伤寒沙门氏菌 ATCC 14028 | 不产酸、不产气,培养液无明显变化 |
从质控结果可以看出,该培养液具有良好的发酵鉴别能力:典型大肠埃希氏菌可产生明显产气反应,而沙门氏菌虽可生长但不发酵乳糖,因此不产生酸和气体。这一差异是大肠菌群初筛判断的重要依据。
操作要点与结果判读
在实际操作中,应根据检测需求选择单料或双料培养液。双料培养液用于处理可能含菌量较高的样品,以降低漏检概率。接种时需严格控制无菌操作,并确保试管中正确放置杜伦发酵管,避免气泡误判。
培养后应重点观察三项指标:一是培养液是否浑浊,反映菌体生长情况;二是溴甲酚紫指示的颜色变化(紫色→黄色),反映是否产酸;三是倒管内是否出现气体,反映是否产气。三者结合判断是否为大肠菌群阳性反应。
需要注意的是,部分非典型菌株可能出现弱产酸或延迟产气现象,因此对于弱阳性结果,应结合复检及后续分离培养进行确认。此外,培养时间过长可能导致气体逸散或颜色回变,应严格按照标准规定时间判读。
贮存与安全注意事项
本品应密封保存于阴凉、干燥、避光环境中,避免吸潮结块或成分降解。开封后应尽快使用并保持瓶口密封,防止污染及性能下降。
称量时应避免粉尘吸入,建议佩戴口罩并在通风条件良好的环境中操作。本产品仅用于实验室微生物检验,不得用于临床诊断或其他用途。
实验结束后的所有带菌培养物及接触材料,应按生物安全规范处理,一般采用 121 ℃高压灭菌 30 min 后再进行废弃处理。
参考文献
GB 8538-2022《食品安全国家标准 饮用天然矿泉水检验方法》
GB/T 5750.12-2023《生活饮用水标准检验方法 第12部分:微生物指标》




