结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂（VRBGA）：肠杆菌科选择性分离培养基
- 2026-06-22 16:22:25
- 逗点生物
结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂（VRBGA）：肠杆菌科选择性分离培养基
产品信息与用途
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | 结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂（VRBGA） |
| 英文名称 | Violet Red Bile Glucose Agar |
| 产品货号 | GF1066 |
| 产品规格 | 250 g/瓶 |
| 保质期 | 未开封条件下三年 |
| 主要用途 | 用于肠杆菌科细菌的分离与计数 |
| 适用标准 | GB 4789.41-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 肠杆菌科检验》 |
配方组成及作用
使用时称取本品 38.5 g，加入蒸馏水或去离子水 1 L，加热搅拌至完全溶解后使用，无需高压灭菌。最终 pH 为 7.4±0.2（25 ℃）。
| 成分 | 用量 | 主要作用 |
|---|---|---|
| 蛋白胨 | 7.0 g/L | 提供氮源、氨基酸及基础营养 |
| 酵母浸膏 | 3.0 g/L | 提供维生素、生长因子及微量元素 |
| 葡萄糖 | 10.0 g/L | 可发酵碳源，用于肠杆菌科产酸反应 |
| 氯化钠 | 5.0 g/L | 维持渗透压稳定 |
| 3号胆盐 | 1.5 g/L | 选择性抑制革兰氏阳性菌 |
| 结晶紫 | 0.002 g/L | 抑制革兰氏阳性菌，增强选择性 |
| 中性红 | 0.03 g/L | pH指示剂，指示葡萄糖发酵产酸反应 |
| 琼脂 | 12.0 g/L | 凝固剂，形成固体培养基 |
检验原理
VRBGA的核心原理是“选择性抑制 + 葡萄糖发酵显色反应”。培养基中的3号胆盐与结晶紫对革兰氏阳性菌具有显著抑制作用，从而提高肠杆菌科细菌的选择性分离能力。
肠杆菌科细菌能够发酵葡萄糖产生酸性代谢产物，使培养基局部pH下降，中性红指示剂在酸性条件下由黄色转变为红色或紫红色，从而形成典型紫红色菌落。部分菌株在胆盐作用下可形成菌落周围的胆盐沉淀环，这是肠杆菌科的重要辅助鉴别特征。
由于该培养基以葡萄糖为发酵底物，可覆盖比乳糖更广泛的肠杆菌科成员，因此不仅适用于典型大肠菌群，也适用于其他肠杆菌科细菌的检测与计数。
质量控制
质控菌株接种后于 36±1 ℃培养 24 h，观察菌落生长情况及特征性反应。
| 质控指标 | 质控菌株及编号 | 特征性反应 |
|---|---|---|
| 生长率 | 大肠埃希氏菌 CMCC(B) 43201 | PR≥0.7，紫红色菌落，周围可见胆盐沉淀环 |
| 生长率 | 弗氏柠檬酸杆菌 CMCC(B) 48098 | PR≥0.7，紫红色菌落，周围可见胆盐沉淀环 |
| 选择性 | 金黄色葡萄球菌 CMCC(B) 26305 | G≤1，生长受抑制或不生长 |
其中PR表示生长恢复率，用于评价目标菌在培养基上的生长能力；G≤1表示受抑制菌生长极弱或不生长，用于评价培养基选择性。理想情况下，肠杆菌科菌株应形成典型紫红色菌落并伴随胆盐沉淀环，而革兰氏阳性菌应被明显抑制。
使用要点与操作说明
VRBGA在配制时无需高压灭菌，这是由于胆盐与部分选择性抑菌成分对热较为敏感，高压灭菌可能降低选择性效果。培养基应通过加热溶解后冷却至适宜温度再倾注平板，以保证成分稳定性与选择性表现。
在实际检测中，可采用倾注平板法或覆盖法进行接种培养。培养温度控制在 36±1 ℃，培养时间一般为 24 h。过长培养时间可能导致菌落扩散或颜色加深，影响判读准确性。
结果判读时应重点关注菌落颜色（紫红色）、菌落形态及是否存在胆盐沉淀环。对于可疑菌落，应结合后续生化试验或分子检测进行确认，以避免误判。
贮存与安全注意事项
干粉培养基应密封保存于阴凉、干燥、避光环境中，防止吸潮及成分降解。开封后应尽快使用并保持瓶口密封。
操作过程中应避免粉尘吸入，建议佩戴口罩并在通风良好环境中进行称量。本产品仅用于实验室微生物检测，不得用于临床诊断或人体相关用途。
实验结束后的所有培养物及污染材料应按生物安全规范处理，一般采用 121 ℃高压灭菌 30 min 后再进行废弃处置。
参考文献
GB 4789.41-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 肠杆菌科检验》
