结晶紫中性红胆盐MUG琼脂（VRBA-MUG）：食品中大肠埃希氏菌计数用荧光鉴别培养基
- 2026-06-22 16:29:53
- 逗点生物
结晶紫中性红胆盐MUG琼脂（VRBA-MUG）：食品中大肠埃希氏菌计数用荧光鉴别培养基
产品信息与用途
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | 结晶紫中性红胆盐MUG琼脂（VRBA-MUG） |
| 英文名称 | Violet Red Bile Agar with MUG |
| 产品货号 | GF1073 |
| 产品规格 | 100 g/瓶 |
| 保质期 | 未开封条件下三年 |
| 主要用途 | 食品中大肠埃希氏菌平板计数 |
| 适用标准 | GB 4789.38-2012 |
配方组成及作用
使用时称取本品 41.6 g，加入蒸馏水或去离子水 1 L，加热搅拌至完全溶解后使用，无需高压灭菌。最终 pH 为 7.4±0.1（25 ℃）。
| 成分 | 用量 | 主要作用 |
|---|---|---|
| 蛋白胨 | 7.0 g/L | 提供氮源、氨基酸及基础营养 |
| 酵母膏粉 | 3.0 g/L | 提供维生素及生长因子 |
| 乳糖 | 10.0 g/L | 可发酵碳源，用于产酸反应 |
| 氯化钠 | 5.0 g/L | 维持渗透压稳定 |
| 3号胆盐 | 1.5 g/L | 抑制革兰氏阳性菌 |
| 结晶紫 | 0.002 g/L | 增强对革兰氏阳性菌的选择性抑制 |
| 中性红 | 0.03 g/L | pH指示剂（酸性变红） |
| MUG | 0.1 g/L | β-葡萄糖醛酸苷酶底物，用于荧光检测 |
| 琼脂 | 15.0 g/L | 凝固剂，形成固体培养基 |
检验原理
VRBA-MUG的检测原理由“选择性抑制 + 乳糖发酵显色 + 酶学荧光反应”三部分组成。
首先，3号胆盐与结晶紫共同作用，抑制革兰氏阳性菌及部分杂菌，从而提高肠道菌群的选择性分离能力。乳糖作为发酵底物，被大肠杆菌等肠道菌利用后产生酸，使培养基pH下降，中性红由黄色转变为紫红色或红色，从而形成典型菌落颜色反应。
更重要的是，大肠埃希氏菌普遍具有β-葡萄糖醛酸苷酶，该酶可水解MUG生成4-甲基伞形酮，在366 nm紫外光照射下产生蓝白色荧光，从而实现对E. coli的特异性快速确认。研究表明约97%的大肠埃希氏菌具有该酶活性，但部分沙门氏菌及志贺氏菌也可能呈弱阳性，因此仍需结合菌落形态与生化试验综合判断。
质量控制
质控菌株接种后于 35～37 ℃培养 18～24 h，观察菌落生长及荧光特征。
| 指标 | 质控菌株及编号 | 标准值 | 特征性反应 |
|---|---|---|---|
| 生长率 | 大肠埃希氏菌 ATCC 25922 | PR≥0.7 | 紫红色/红色菌落，有沉淀环，紫外下产生荧光 |
| 特异性 | 弗氏柠檬酸杆菌 ATCC 43864 | — | 红色菌落，可带沉淀环，无荧光 |
| 选择性 | 粪肠球菌 ATCC 29212 | G≤5 | 生长受抑制或极弱生长 |
其中PR表示生长恢复率，用于评价目标菌生长能力；G≤5表示非目标菌受到有效抑制。
使用要点与操作说明
VRBA-MUG培养基在配制过程中严禁高压灭菌，因为胆盐、结晶紫及MUG均对热较敏感，高温可能导致选择性降低或荧光底物失效。因此应采用加热溶解后直接倾注平板的方法。
倾注温度应控制在约45～50 ℃，避免过高温度破坏MUG结构。培养条件一般为 35～37 ℃，培养时间18～24 h。
结果判读时需同时观察三项指标：菌落颜色（乳糖发酵）、紫外荧光（MUG水解）以及菌落形态。典型大肠埃希氏菌应表现为紫红色菌落并在紫外灯下产生明显蓝白色荧光。
由于部分非大肠杆菌可能出现弱荧光或类似颜色反应，因此最终判定应结合后续生化试验或分子检测确认。
贮存与安全注意事项
干粉培养基应密封保存于阴凉、干燥、避光环境中，防止吸潮及MUG降解。开封后应尽快使用，并保持瓶口密封。
操作过程中应避免粉尘吸入，建议佩戴口罩并在通风良好环境中操作。本产品仅用于实验室微生物检测，不得用于临床诊断或人体用途。
实验结束后的所有培养物及污染材料应按生物安全规范处理，一般采用 121 ℃高压灭菌 30 min 后再进行废弃处置。
参考文献
GB 4789.38-2012《食品安全国家标准 食品微生物检验 大肠埃希氏菌计数》
