TSC琼脂基础（胰胨-亚硫酸盐-环丝氨酸）：产气荚膜梭菌平板计数专用培养基
- 2026-06-22 16:33:27
- 逗点生物
TSC琼脂基础（胰胨-亚硫酸盐-环丝氨酸）：产气荚膜梭菌平板计数专用培养基
产品信息与用途
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | 胰胨-亚硫酸盐-环丝氨酸（TSC）琼脂基础 |
| 英文名称 | Tryptose Sulfite Cycloserine (TSC) Agar Base |
| 产品货号 | GF1075 |
| 产品规格 | 250 g/瓶 |
| 保质期 | 未开封条件下三年 |
| 主要用途 | 产气荚膜梭菌平板计数 |
| 适用标准 | GB 4789.13-2012 |
配方组成及作用
使用时称取本品 42.0 g，加入蒸馏水或去离子水 1 L，加热搅拌至完全溶解后分装三角瓶，于 121 ℃高压灭菌 15 min。冷却至约 50 ℃后，每 100 mL 基础培养基加入配套试剂 TJ027，混匀后倾注无菌平皿备用。最终 pH 为 7.6±0.2（25 ℃）。
| 成分 | 用量 | 主要作用 |
|---|---|---|
| 胰胨 | 15.0 g/L | 提供氮源、氨基酸及基础营养 |
| 大豆胨 | 5.0 g/L | 补充植物来源蛋白水解物及维生素 |
| 酵母粉 | 5.0 g/L | 提供维生素、生长因子及微量元素 |
| 焦亚硫酸钠 | 1.0 g/L | 提供还原环境并参与硫化氢显色反应 |
| 柠檬酸铁铵 | 1.0 g/L | 与H₂S反应生成黑色硫化铁沉淀 |
| D-环丝氨酸 | ——（由配套试剂提供） | 选择性抑制非目标革兰氏阳性菌 |
| 琼脂 | 15.0 g/L | 凝固剂，形成固体培养基 |
| 最终 pH | 7.6±0.2 | 适宜产气荚膜梭菌生长环境 |
检验原理
TSC培养基的核心机制是“选择性抑制 + 硫化氢显色反应”。
胰胨、大豆胨和酵母粉提供丰富的氮源、维生素及生长因子，使产气荚膜梭菌能够在厌氧条件下快速生长并形成典型菌落。D-环丝氨酸通过干扰细胞壁合成，选择性抑制多数非梭菌革兰氏阳性菌，从而提高目标菌检出率。
焦亚硫酸钠在厌氧代谢过程中参与硫还原反应，产气荚膜梭菌可将其还原为硫化氢（H₂S），并与柠檬酸铁铵中的铁离子反应生成黑色硫化铁沉淀，使菌落呈现典型黑色中心，这是其最重要的鉴别特征。
因此，在该培养基上，产气荚膜梭菌通常表现为黑色或黑心菌落，而非目标菌则受到明显抑制或不生长。
质量控制
质控菌株接种后于 35～37 ℃厌氧培养 20～24 h，观察生长及菌落特征。
| 质控指标 | 质控菌株及编号 | 质控评定标准 | 特征性反应 |
|---|---|---|---|
| 生长率 | 产气荚膜梭菌 ATCC 13124 | PR≥0.7 | 黑色菌落 |
| 选择性 | 艰难梭菌 ATCC 43593 | G≤1 | 生长受抑制或极弱生长 |
其中PR表示生长恢复率，用于评价目标菌在选择性环境中的生长能力；G≤1表示非目标菌受到显著抑制。理想情况下，产气荚膜梭菌应形成典型黑色菌落，而艰难梭菌等非目标菌应基本不生长。
使用要点与操作说明
TSC培养基必须在严格厌氧条件下使用，这是产气荚膜梭菌生长与显色的必要条件。培养基在灭菌后应冷却至50 ℃左右再加入配套选择性试剂，以避免环丝氨酸等活性成分失效。
倾注平板时应保证培养基均匀分布，避免气泡影响厌氧环境建立。培养温度控制在 35～37 ℃，培养时间为 20～24 h，过长培养可能导致菌落扩散或背景干扰增加。
结果判读时应重点观察菌落颜色及中心黑色沉淀形成情况，并结合后续生化试验或分子检测进行确认，以提高结果准确性。
贮存与安全注意事项
干粉培养基应密封保存于阴凉、干燥、避光环境中，防止吸潮及成分降解。开封后应尽快使用，并保持瓶口密封。
操作过程中应避免粉尘吸入，建议佩戴口罩并在通风良好环境中操作。本产品仅用于实验室微生物检测，不得用于临床诊断或人体用途。
实验结束后的所有培养物及污染材料应按生物安全规范处理，一般采用 121 ℃高压灭菌 30 min 后再进行废弃处置。
参考文献
GB 4789.13-2012《食品安全国家标准 食品微生物学检验 产气荚膜梭菌检验》
