含铁牛乳培养基：产气荚膜梭菌“暴烈发酵”鉴定专用培养基

产品信息与用途

使用时称取本品 161.0 g，加入 50～60 ℃温水 1 L 溶解后分装试管，于 118 ℃高压灭菌 12 min，灭菌后迅速冷却。该培养基必须现配现用，以保证牛乳体系稳定性与反应灵敏度。

成分	用量	主要作用
全脂奶粉	160.0 g/L	提供乳糖与酪蛋白，作为发酵与凝固底物
硫酸亚铁	1.0 g/L	参与氧化还原反应，增强发酵过程可视化效果

含铁牛乳培养基的核心原理是利用产气荚膜梭菌对乳糖的快速发酵能力及其强烈的产气特性。

产气荚膜梭菌在厌氧条件下迅速发酵乳糖，产生大量气体，同时乳酸等代谢产物导致pH下降，使牛乳中的酪蛋白迅速凝固并被气体破坏，形成明显的“凝固—破裂—产气”现象，即典型的“暴烈发酵（stormy fermentation）”。

硫酸亚铁在体系中起到增强反应可视化的作用，可辅助观察发酵过程中局部还原环境变化，使反应特征更加明显。

因此，该培养基通过“快速产酸 + 强产气 + 蛋白凝固破裂”三重现象，实现对产气荚膜梭菌的高度特征性鉴别。

质控菌株接种后于 46±0.5 ℃水浴培养 2～5 h，观察发酵反应情况。

质控指标	质控菌株及编号	质控评定标准
生长表现	产气荚膜梭菌 ATCC 13124	出现典型“暴烈发酵”（凝固破裂伴大量产气）
阴性对照	大肠埃希氏菌 ATCC 25922	不发酵，培养基无明显凝固破裂现象

该结果表明培养基能够有效区分产气荚膜梭菌与非产气发酵菌，具有较强的特异性鉴别能力。

该培养基必须新鲜配制使用，这是保证实验结果可靠性的关键。牛乳体系在储存过程中易发生蛋白质变性或微生物污染，从而影响“暴烈发酵”现象的清晰度。

灭菌后应迅速冷却并避免长时间静置，以防蛋白体系结构变化。接种后应在严格控制的 46±0.5 ℃水浴条件下培养，这是产气荚膜梭菌快速生长与发酵的适宜温度。

培养过程中应避免剧烈震荡，以免影响气体分布与凝固结构观察。结果判读应重点关注是否出现“凝固破裂+产气+乳凝块破碎”的典型组合现象。

干粉培养基应密封保存于阴凉、干燥、避光环境中，防止吸潮结块及成分变质。开封后应尽快使用。

操作过程中应避免粉尘吸入，建议佩戴口罩并在通风良好环境下操作。本产品仅用于实验室微生物检测，不得用于临床诊断或人体用途。

实验结束后的所有培养物及污染材料应按生物安全规范处理，一般采用 121 ℃高压灭菌 30 min 后再进行废弃处置。

GB 4789.13-2012《食品安全国家标准食品微生物学检验产气荚膜梭菌检验》
GB 8538-2016《食品安全国家标准饮用天然矿泉水检验方法》