MUG营养琼脂(NA-MUG):饮用水中大肠埃希氏菌滤膜法荧光检测培养基

2026-06-22 16:40:11
逗点生物
简介

MUG营养琼脂(NA-MUG):饮用水中大肠埃希氏菌滤膜法荧光检测培养基

产品信息与用途

项目 内容
产品名称 MUG营养琼脂(NA-MUG)
英文名称 MUG-Nutrient Agar
产品货号 GF1078
产品规格 100 g/瓶
保质期 未开封条件下三年
主要用途 饮用水及水源水中大肠埃希氏菌滤膜法检测
适用标准 GB/T 5750.12-2023

配方组成及作用

使用时称取本品 23.1 g,加入蒸馏水或去离子水 1 L,加热搅拌至完全溶解后分装,于 121 ℃高压灭菌 15 min,倒平板备用。最终 pH 为 6.8±0.2(25 ℃)。

成分 用量 主要作用
蛋白胨 5.0 g/L 提供氮源、氨基酸及基础营养
牛肉浸膏 3.0 g/L 提供碳源、维生素及生长因子
琼脂 15.0 g/L 凝固剂,形成固体培养基
MUG 0.1 g/L β-葡萄糖醛酸苷酶底物,用于荧光检测
最终 pH 6.8±0.2 适宜大肠菌生长及酶活表达环境

检验原理

NA-MUG培养基的检测基础是“β-葡萄糖醛酸苷酶荧光反应”。

蛋白胨与牛肉浸膏提供基础营养物质,使目标菌能够在低选择性环境中正常生长并表达酶活性。大肠埃希氏菌普遍含有β-葡萄糖醛酸苷酶,该酶可特异性水解MUG(4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖醛酸苷)的糖苷键,释放4-甲基伞形酮。

在 366 nm 紫外光照射下,4-甲基伞形酮产生蓝白色荧光,从而实现对大肠埃希氏菌的快速确认。

需要注意的是,约97%的大肠埃希氏菌具有该酶活性,但部分沙门氏菌(约10%)及少数志贺氏菌也可能呈弱阳性,因此需结合菌落形态与滤膜培养结果综合判断。

质量控制

质控菌株接种后于 35~37 ℃培养 24 h,观察荧光反应。

质控指标 质控菌株及编号 质控评定标准
特异性 大肠埃希氏菌 ATCC 25922 366 nm紫外灯下产生蓝白色荧光
特异性 弗氏柠檬酸杆菌 ATCC 43864 不产生荧光
特异性 鼠伤寒沙门氏菌 ATCC 14028 不产生荧光

该结果表明培养基对大肠埃希氏菌具有良好的荧光鉴别能力,同时对常见非目标肠道菌具有一定区分度。

使用要点与操作说明

NA-MUG培养基在使用过程中应注意避光操作,MUG对光较为敏感,长期暴露可能降低反应灵敏度。

灭菌条件为 121 ℃、15 min,灭菌后应充分冷却再倾注平板,以避免荧光底物降解。培养温度一般为 35~37 ℃,培养时间约24 h。

荧光判读需在 366 nm 紫外灯下进行,应在暗室或避光条件下观察,避免背景光干扰。典型阳性表现为菌落周围或菌体区域出现明显蓝白色荧光。

该培养基主要用于滤膜法后的确认步骤,不作为初筛培养基使用。

贮存与安全注意事项

干粉培养基应密封保存于阴凉、干燥、避光环境中,防止吸潮及MUG降解。开封后应尽快使用,并保持瓶口密封。

操作过程中应避免粉尘吸入,建议佩戴口罩并在通风良好环境下操作。本产品仅用于实验室微生物检测,不得用于临床诊断或人体用途。

实验结束后的所有培养物及污染材料应按生物安全规范处理,一般采用 121 ℃高压灭菌 30 min 后再进行废弃处置。

参考文献

GB/T 5750.12-2023《生活饮用水标准检验方法 第12部分:微生物指标》