HE琼脂培养基（Hektoen Enteric Agar）：沙门氏菌选择性分离培养基
- 2026-06-22 16:41:30
- 逗点生物
HE琼脂培养基（Hektoen Enteric Agar）：沙门氏菌选择性分离培养基
产品信息与用途
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | HE琼脂培养基 |
| 英文名称 | Hektoen Enteric Agar |
| 产品货号 | GF1079 |
| 产品规格 | 250 g/瓶 |
| 保质期 | 未开封条件下三年 |
| 主要用途 | 沙门氏菌选择性分离培养 |
| 适用标准 | GB 4789相关食品微生物检验方法 |
配方组成及作用
使用时称取本品 93.8 g，加入蒸馏水或去离子水 1 L，加热搅拌至完全溶解（避免过度加热），不建议高压灭菌，冷却至 48±2 ℃后倾注无菌平皿，待凝固后备用。最终 pH 为 7.5±0.2（25 ℃）。
| 成分 | 用量 | 主要作用 |
|---|---|---|
| 蛋白胨 | 12.0 g/L | 提供氮源、氨基酸及基础营养 |
| 牛肉浸粉 | 3.0 g/L | 提供维生素及生长因子 |
| 乳糖 | 12.0 g/L | 可发酵碳源 |
| 蔗糖 | 12.0 g/L | 可发酵碳源 |
| 水杨苷 | 2.0 g/L | 辅助糖类底物及发酵指示体系 |
| 胆盐 | 20.0 g/L | 强选择性抑制革兰氏阳性菌 |
| 氯化钠 | 5.0 g/L | 维持渗透压平衡 |
| 硫代硫酸钠 | 6.8 g/L | 提供硫源，用于H₂S检测 |
| 柠檬酸铁铵 | 0.8 g/L | 与H₂S反应形成黑色沉淀 |
| 脱氧酸铁铵 | 2.0 g/L | 增强硫化氢显色反应灵敏度 |
| 酸性品红 | 0.1 g/L | pH指示剂（碱性呈蓝绿色） |
| 溴麝香草酚蓝 | 0.064 g/L | pH指示剂（酸性呈黄色） |
| 琼脂 | 18.0 g/L | 凝固剂 |
| 最终 pH | 7.5±0.2 | 适宜肠道菌生长环境 |
检验原理
HE琼脂培养基的核心原理是“三糖发酵 + H₂S产生 + 强选择性抑菌体系”的综合鉴别机制。
乳糖、蔗糖及水杨苷作为可发酵底物，可被肠道菌代谢产生有机酸，使培养基pH下降。此时溴麝香草酚蓝与酸性品红发生颜色变化，使菌落呈橙黄色；而不发酵糖类的致病菌（如沙门氏菌、志贺氏菌）则维持碱性环境，呈蓝绿色菌落。
胆盐及多种指示染料共同作用，抑制革兰氏阳性菌及部分非目标肠道菌生长，从而提高选择性。
硫代硫酸钠在细菌代谢过程中可被还原为硫化氢（H₂S），与柠檬酸铁铵及脱氧铁盐反应生成黑色硫化铁沉淀，使沙门氏菌菌落中心呈黑色，从而形成典型“蓝绿菌落+黑心”特征。
质量控制
培养基倾注平板冷却后呈草绿色。质控菌株接种后于 36±1 ℃培养 18～24 h，观察结果如下：
| 质控指标 | 质控菌株及编号 | 质控评定标准 |
|---|---|---|
| 生长率 | 肠沙门氏菌肠亚种鼠伤寒血清型 ATCC 14028 | PR≥0.5，蓝绿色菌落，菌落中心可见黑心 |
| 特异性 | 福氏志贺氏菌 CMCC(B) 51572 | 蓝绿色菌落，无黑心 |
| 选择性 | 粪肠球菌 ATCC 29212 | G≤1，基本不生长 |
PR表示生长恢复率，G≤1表示抑制程度良好，确保非目标菌受到有效控制。
使用要点与操作说明
HE琼脂培养基在配制过程中应避免过度加热，以防糖类及指示剂降解影响颜色反应。由于其含有多种热敏性色素体系，一般不建议高压灭菌，而采用加热溶解后直接倾注的方法。
倾注温度应控制在48±2 ℃，避免高温破坏选择性组分及指示剂体系。平板应均匀无气泡，以保证菌落形态清晰可辨。
培养条件一般为 36±1 ℃，培养时间18～24 h。过长培养可能导致颜色回变或菌落融合，影响判读准确性。
菌落判读时需综合观察三项特征：颜色变化（发酵与否）、是否产黑心（H₂S）、以及菌落形态，以实现对沙门氏菌与志贺氏菌的初步区分。
贮存与安全注意事项
干粉培养基应密封保存于阴凉、干燥、避光环境中，防止吸潮及成分失活。开封后应尽快使用并保持瓶口密封。
操作过程中应避免粉尘吸入，建议佩戴口罩并在通风良好环境下操作。本产品仅用于实验室微生物检测，不得用于临床诊断或人体用途。
实验结束后的所有培养物及污染材料应按生物安全规范处理，一般采用 121 ℃高压灭菌 30 min 后再进行废弃处置。
参考文献
GB 4789相关食品微生物检验方法
