PYG液体培养基基础:双歧杆菌选择性增菌培养专用培养基

2026-06-22 16:57:54
逗点生物
简介

PYG液体培养基基础:双歧杆菌选择性增菌培养专用培养基

产品信息与用途

项目 内容
产品名称 PYG液体培养基基础
英文名称 PYG Broth Base
产品货号 GF1083
产品规格 250 g/瓶
保质期 未开封条件下三年
主要用途 双歧杆菌增菌培养
适用标准 GB 4789.34-2016

配方组成及作用

使用时称取本品 36.1 g,加入蒸馏水或去离子水 1 L,加热搅拌至完全溶解后分装三角瓶,于 121 ℃高压灭菌 15 min。冷却至 50 ℃以下后,每 100 mL 培养基加入配套试剂 TJ017(氯化血红素 2.5 mg)及 TJ018(维生素K₁ 1 mg)各1支,混匀后使用。最终 pH 为 6.0±0.1(25 ℃)。

成分 用量 主要作用
蛋白胨 20.0 g/L 提供氮源、氨基酸及基础营养
酵母粉 10.0 g/L 提供维生素、生长因子及微量元素
葡萄糖 5.0 g/L 提供可发酵碳源
半胱氨酸盐酸盐 0.5 g/L 降低氧化还原电位,促进厌氧环境形成
碳酸氢钠 0.4 g/L 提供缓冲能力并维持厌氧代谢环境
磷酸氢二钾 0.04 g/L 缓冲体系,维持pH稳定
磷酸二氢钾 0.04 g/L 缓冲体系组成
氯化钠 0.08 g/L 维持渗透压
氯化钙 0.008 g/L 提供微量元素,促进酶活性
硫酸镁 0.008 g/L 提供镁离子,维持代谢功能
最终 pH 6.0±0.1 适宜双歧杆菌生长的弱酸性环境

检验原理

PYG培养基的核心原理是通过“高营养支持 + 厌氧环境促进因子”实现双歧杆菌的高效富集。

蛋白胨与酵母粉提供丰富的氮源、维生素及生长因子,葡萄糖作为主要能量来源支持双歧杆菌快速代谢。半胱氨酸盐酸盐作为还原性物质,可有效降低培养体系氧化还原电位,从而改善厌氧菌生长条件。

碳酸氢钠及磷酸盐缓冲体系共同维持稳定的pH环境,避免代谢产物导致酸化抑制菌体生长。钙、镁及氯化钠等微量离子则参与酶系统及细胞结构稳定。

此外,配套添加的氯化血红素与维生素K₁可进一步提供双歧杆菌生长所需的关键厌氧因子,显著提高其恢复率与增殖效率。

质量控制

质控菌株接种后于 35~37 ℃厌氧培养 48 h±2 h,观察肉汤生长情况。

质控指标 质控菌株及编号 质控评定标准
生长率 两歧双歧杆菌 CICC 6071 肉汤明显浑浊
生长率 婴儿双歧杆菌 CICC 6069 肉汤明显浑浊

该结果表明培养基能够有效支持不同来源双歧杆菌的厌氧增殖能力,适用于标准化检测体系。

使用要点与操作说明

PYG培养基在使用过程中需严格控制厌氧条件,这是双歧杆菌成功增菌的关键因素之一。灭菌后应在50 ℃以下加入氯化血红素及维生素K₁,以避免高温破坏活性成分。

培养条件一般为 35~37 ℃厌氧培养 48 h±2 h。培养过程中应避免氧气暴露,以防影响双歧杆菌生长恢复。

由于该培养基营养丰富,适用于选择性较弱的增菌阶段,因此通常与后续分离培养基联合使用,以完成双歧杆菌的分离鉴定流程。

贮存与安全注意事项

干粉培养基应密封保存于阴凉、干燥、避光环境中,防止吸潮及成分降解。开封后应尽快使用,并保持瓶口密封。

操作过程中应避免粉尘吸入,建议佩戴口罩并在通风良好环境下操作。本产品仅用于实验室微生物检测,不得用于临床诊断或人体用途。

实验结束后的所有培养物及污染材料应按生物安全规范处理,一般采用 121 ℃高压灭菌 30 min 后再进行废弃处置。

参考文献

GB 4789.34-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 双歧杆菌检验》