MRS琼脂培养基:乳酸菌与双歧杆菌分离培养的经典基础培养基

2026-06-22 16:58:55
逗点生物
简介

MRS琼脂培养基:乳酸菌与双歧杆菌分离培养的经典基础培养基

产品信息与用途

项目 内容
产品名称 MRS琼脂培养基
英文名称 MRS Agar Medium
产品货号 GF1084
产品规格 250 g/瓶
保质期 未开封条件下三年
主要用途 乳酸菌分离、计数与培养
扩展用途 改良后用于双歧杆菌分离与计数
适用标准 GB 4789.35-2023

配方组成及作用

使用时称取本品 70.2 g,加入蒸馏水或去离子水 1 L,加热搅拌至完全溶解后分装,于 121 ℃高压灭菌 15 min。冷却至约 50 ℃后倾注平板备用。最终 pH 为 6.2±0.2(25 ℃)。

成分 用量 主要作用
蛋白胨 10.0 g/L 提供氮源、氨基酸及基础营养
牛肉浸粉 10.0 g/L 提供维生素与生长因子
酵母浸粉 5.0 g/L 提供B族维生素及微量元素
葡萄糖 20.0 g/L 提供主要可发酵碳源
吐温-80 1.0 mL/L 提供脂肪酸来源并促进乳酸菌生长
磷酸氢二钾 2.0 g/L 缓冲体系,维持pH稳定
醋酸钠 5.0 g/L 抑制杂菌并促进乳酸菌生长
柠檬酸三铵 2.0 g/L 提供络合离子及生长促进作用
硫酸镁 0.1 g/L 提供镁离子,参与酶反应
硫酸锰 0.05 g/L 促进乳酸菌代谢活性
琼脂 15.0 g/L 凝固剂
最终 pH 6.2±0.2 适宜乳酸菌生长的弱酸环境

检验原理

MRS琼脂培养基通过“高营养 + 弱酸性 + 代谢抑制体系”实现对乳酸菌的选择性培养。

蛋白胨、牛肉浸粉与酵母浸粉共同提供丰富的氮源、维生素及生长因子,葡萄糖作为主要碳源支持乳酸菌快速发酵代谢。乳酸菌在代谢过程中产生有机酸,使其更适应低pH环境,从而在6.2左右的培养体系中占据优势。

醋酸钠、柠檬酸盐及吐温-80等成分在提供营养辅助的同时,对部分革兰氏阴性菌及竞争性杂菌具有一定抑制作用,从而提高选择性。

改良MRS体系中加入莫匹罗星锂盐与半胱氨酸盐酸盐后,可进一步增强对非目标菌的抑制,并改善双歧杆菌等厌氧菌的生长条件,使其在厌氧环境中获得更高的检出率。

质量控制

MRS基础培养基质控

质控指标 质控菌株及编号 标准值 特征性反应
生长率 德氏乳杆菌保加利亚亚种 CICC6032 PR≥0.7 无色不透明菌落,边缘不规则
生长率 嗜热链球菌 IFFI6038 圆形凸起,小型菌落
生长率 婴儿双歧杆菌 CICC6069(厌氧) 瓷白色菌落,边缘整齐

改良MRS培养基质控

质控指标 质控菌株及编号 标准值 特征性反应
生长率 婴儿双歧杆菌 CICC6069(厌氧) PR≥0.7 圆形凸起,边缘整齐
选择性 德氏乳杆菌保加利亚亚种 CICC6032 G≤1 抑制生长
选择性 嗜热链球菌 IFFI6038 G≤1 抑制生长

PR表示生长恢复率,G≤1表示选择性抑制效果良好。

使用要点与操作说明

MRS培养基在使用过程中需注意溶解均匀性与灭菌条件控制。121 ℃、15 min灭菌可保证基础培养基稳定性,但改良组分需在冷却至50 ℃以下后加入,以避免活性成分失活。

培养条件通常为 35~37 ℃,培养时间48±2 h。双歧杆菌培养必须在厌氧条件下进行,否则生长显著受限。

由于该培养基营养丰富,适用于乳酸菌及双歧杆菌的分离与计数,但不同菌种菌落形态差异明显,应结合形态学与后续生化或分子检测进行确认。

贮存与安全注意事项

干粉培养基应密封保存于阴凉、干燥、避光环境中,防止吸潮及成分降解。开封后应尽快使用,并保持瓶口密封。

操作过程中应避免粉尘吸入,建议佩戴口罩并在通风良好环境下操作。本产品仅用于实验室微生物检测,不得用于临床诊断或人体用途。

实验结束后的所有培养物及污染材料应按生物安全规范处理,一般采用 121 ℃高压灭菌 30 min 后再进行废弃处置。

参考文献

GB 4789.35-2023《食品安全国家标准 食品微生物学检验 乳酸菌检验》