假单胞菌琼脂基础培养基/CN琼脂：铜绿假单胞菌选择性分离培养基
- 2026-06-22 17:33:16
- 逗点生物
假单胞菌琼脂基础培养基/CN琼脂：铜绿假单胞菌选择性分离培养基
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | 假单胞菌琼脂基础培养基/CN琼脂 |
| 英文名称 | CN Agar |
| 货号 | GF1089 |
| 规格 | 250 g/瓶 |
| 保质期 | 未开封三年 |
| 产品用途 | 用于铜绿假单胞菌的选择性分离和培养 |
| 适用标准 | 可用于GB 8538-2022《食品安全国家标准 饮用天然矿泉水检验方法》中相关检验环节 |
| 培养条件 | 36±1℃需氧培养24–48 h |
| 典型结果 | 铜绿假单胞菌生长良好，可产生绿色或蓝绿色色素 |
配方组成及作用
| 成分 | 用量 | 主要作用 | 用途说明 |
|---|---|---|---|
| 明胶蛋白胨 | 16.0 g/L | 提供氮源、氨基酸和多肽 | 支持铜绿假单胞菌及部分假单胞菌生长 |
| 胰蛋白胨 | 10.0 g/L | 提供氮源、碳源和生长所需营养 | 增强培养基营养水平，提高目标菌恢复与增殖能力 |
| 硫酸钾 | 10.0 g/L | 提供无机盐，参与渗透压和离子环境调节 | 与镁盐共同促进铜绿假单胞菌色素产生 |
| 氯化镁 | 1.4 g/L | 提供镁离子 | 有助于铜绿假单胞菌色素表达和稳定生长 |
| 十六烷基三甲基溴化铵/西曲溴铵类抑菌剂 | 0.2 g/L | 选择性抑制剂 | 抑制部分革兰氏阳性菌和非目标菌，同时铜绿假单胞菌具有较强耐受性 |
| 萘啶酮酸 | 0.015 g/L | 抑制部分革兰氏阴性杂菌 | 提高对铜绿假单胞菌的选择性 |
| 琼脂 | 15.0 g/L | 凝固剂 | 形成固体平板，便于菌落分离和观察 |
| 甘油 | 10 mL/L，另加 | 易利用碳源 | 促进铜绿假单胞菌生长及色素产生 |
| 最终pH | 7.1±0.2，25℃ | 维持适宜酸碱环境 | 保证培养基选择性和目标菌生长稳定性 |
检验原理
CN琼脂的核心作用是“选择性生长+色素辅助识别”。明胶蛋白胨和胰蛋白胨提供目标菌生长所需的基础营养，甘油作为铜绿假单胞菌较易利用的碳源，有助于菌体增殖和色素形成。硫酸钾和氯化镁可改善无机盐环境，促进铜绿假单胞菌产生绿脓菌素、荧光素等特征性色素，使菌落更便于识别。
培养基中的十六烷基三甲基溴化铵类抑菌剂具有表面活性剂特性，可抑制多种伴生菌；萘啶酮酸则对部分革兰氏阴性杆菌具有抑制作用。两者配合使用，可减少背景菌干扰，使铜绿假单胞菌在样品菌群较复杂的情况下更容易被分离出来。
需要注意的是，CN琼脂具有选择性，但并非单独确认培养基。若平板上出现疑似铜绿假单胞菌菌落，应进一步进行氧化酶试验、产色素观察、生化鉴定或其他确认试验。
使用方法
称取本品52.6 g，加入蒸馏水或去离子水1 L，另加入甘油10 mL，搅拌加热煮沸至完全溶解。分装后于121℃高压灭菌15 min。灭菌结束后冷却至适宜温度，混匀后倾注无菌平皿，凝固后备用。
制备过程中应注意甘油需要按比例另行加入，并充分混匀。加热溶解时应避免长时间过度煮沸，以免影响培养基体积和成分稳定性。灭菌后的培养基如出现明显沉淀、颜色异常、凝固不良或污染，应停止使用。
质量控制
按标签方法制备培养基后，接种以下质控菌株，置36±1℃需氧培养24–48 h，观察生长情况、选择性及色素表现。
| 质控指标 | 质控菌株及编号 | 质控评定标准 |
|---|---|---|
| 生长率 | 铜绿假单胞菌 ATCC 27853 | PR≥0.7，生长良好，产绿色色素 |
| 选择性 | 大肠埃希氏菌 ATCC 25922 | G≤1，生长受明显抑制 |
其中，PR≥0.7表示目标菌在该培养基上的生长性能应达到规定要求；G≤1表示受抑制菌株应不生长或仅有极弱生长。若铜绿假单胞菌生长差或不产色素，应重点检查培养基配制量、甘油添加量、pH、灭菌条件、培养温度、菌株活性及平板储存状态。若大肠埃希氏菌生长明显，则需关注选择性成分是否失效、称量是否准确或灭菌操作是否异常。
操作与储存注意事项
本品不得用于临床检验。干粉培养基称量时应注意粉尘防护，建议佩戴口罩，避免吸入粉尘引起呼吸道不适。使用后应立即密封瓶盖，置于避光、干燥处保存，防止吸潮结块。未开封产品在规定条件下保质期为三年；开封后受环境湿度、取用频次和密封状态影响，保质时间可能缩短，应根据实际情况评估。
实验结束后，所有带菌平板、接种工具及污染物应按实验室生物安全要求处理，检测后的带菌物品建议置于121℃高压灭菌30 min后再进行废弃处理。
