克罗诺杆菌筛选肉汤基础：用于克罗诺杆菌选择性增菌的鉴别性培养基
- 2026-06-22 17:36:40
- 逗点生物
克罗诺杆菌筛选肉汤基础：用于克罗诺杆菌选择性增菌的鉴别性培养基
产品信息与用途
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | 克罗诺杆菌筛选肉汤基础 |
| 英文名称 | Cronobacter Selective Broth Base |
| 货号 | GF1092 |
| 产品规格 | 250 g/瓶 |
| 保质期 | 未开封三年 |
| 产品用途 | 用于克罗诺杆菌的选择性增菌培养 |
| 使用方式 | 灭菌后冷却至约50℃，按要求加入万古霉素后使用 |
| 培养条件 | 36±1℃培养18～24 h |
| 典型阳性表现 | 肉汤浑浊，并因产酸使指示剂变黄 |
配方组成及作用
| 成分 | 用量 | 主要作用 | 用途说明 |
|---|---|---|---|
| 动物组织的酶消化物 | 10.0 g/L | 提供氮源、氨基酸和多肽 | 支持克罗诺杆菌及部分肠杆菌科细菌生长 |
| 牛肉浸粉 | 3.0 g/L | 提供氮源、维生素、矿物质和生长因子 | 改善菌体恢复和增殖状态 |
| 氯化钠 | 5.0 g/L | 维持渗透压平衡 | 保持细胞正常生理环境 |
| 溴甲酚紫 | 0.04 g/L | pH指示剂 | 当细菌发酵蔗糖产酸时，培养基由紫色转为黄色 |
| 蔗糖 | 10.0 g/L | 可发酵糖类，碳源 | 用于观察克罗诺杆菌利用蔗糖产酸的鉴别反应 |
| 万古霉素 | 终浓度10 mg/L，另加 | 选择性抑菌剂 | 抑制革兰氏阳性菌等伴生菌，提高培养基选择性 |
| 最终pH | 7.4±0.2，25℃ | 维持适宜初始酸碱环境 | 保证目标菌生长及指示剂显色稳定 |
检验原理
克罗诺杆菌筛选肉汤的核心原理是“营养增菌、抗生素选择、糖发酵显色”。动物组织酶消化物和牛肉浸粉为细菌提供基础营养，使经前处理或受损的目标菌得到恢复和增殖。蔗糖作为主要可发酵糖类，若被目标菌利用并产生酸性代谢产物，培养基pH下降，溴甲酚紫由紫色或紫蓝色转为黄色。
万古霉素属于抑制革兰氏阳性菌较强的抗生素，对许多革兰氏阳性伴生菌有抑制作用。由于克罗诺杆菌属于革兰氏阴性杆菌，对万古霉素通常具有相对耐受性，因此在加入万古霉素后，培养基可减少部分背景菌干扰，使克罗诺杆菌获得更好的选择性增菌条件。
需要注意的是，筛选肉汤出现浑浊并变黄，提示可能存在可利用蔗糖产酸的目标菌或相近菌群，但不能单独作为克罗诺杆菌确证依据。后续仍应结合选择性分离平板、典型菌落观察、生化鉴定或分子方法进行确认。
使用方法
称取本品28.04 g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解。121℃高压灭菌15 min。灭菌后冷却至约50℃时，每100 mL培养基中加入万古霉素1 mg，混匀后分装备用。
按上述添加量计算，万古霉素终浓度为10 mg/L。万古霉素不宜与基础培养基一起高压灭菌，应待培养基灭菌并冷却后无菌加入，以免高温影响其抑菌活性。加入后应充分混匀，避免抗生素分布不均造成选择性不稳定。
质量控制
按标签用法制备培养基，并加入规定浓度万古霉素后，接种质控菌株，于36±1℃培养18～24 h，观察肉汤浑浊度和颜色变化。
| 质控指标 | 质控菌株及编号 | 质控评定标准 |
|---|---|---|
| 生长及鉴别反应 | 阪崎克罗诺杆菌 ATCC 29544 | 肉汤浑浊，变黄 |
| 生长及鉴别反应 | 大肠埃希氏菌 ATCC 25922 | 肉汤浑浊，不变黄 |
| 选择性 | 金黄色葡萄球菌 ATCC 25923 | 肉汤澄清 |
其中，阪崎克罗诺杆菌ATCC 29544应表现为良好生长并使培养基变黄，说明培养基营养支持能力和蔗糖产酸显色系统正常。大肠埃希氏菌ATCC 25922可作为非目标革兰氏阴性对照，预期可生长但不发生黄色反应，用于观察鉴别性。金黄色葡萄球菌ATCC 25923应被抑制，肉汤保持澄清，用于评价万古霉素选择性是否有效。
若目标菌不生长或不变黄，应重点检查培养温度、培养时间、菌株活性、培养基pH、蔗糖含量及指示剂状态。若金黄色葡萄球菌生长明显，则需检查万古霉素是否漏加、添加浓度是否不足、抗生素是否失效或加入时温度过高导致活性下降。
操作与储存注意事项
本品不得用于临床检验。干粉培养基称量时应注意粉尘防护，建议佩戴口罩，避免吸入粉尘引起呼吸道不适。干粉培养基使用后应立即密封，置于避光、干燥处保存，防止吸潮结块。未开封产品在规定条件下保质期为三年；开封后保质时间会受环境湿度、密封状态和取用频次影响，应根据实际保存条件评估。
配制后的培养基应注意无菌操作，特别是在加入万古霉素时，应避免二次污染。若培养基出现异常浑浊、沉淀、颜色异常或pH明显偏移，不宜继续使用。检测结束后的带菌培养物、吸头、试管及其他污染物，应按实验室生物安全要求处理，建议经121℃高压灭菌30 min后再废弃。
