马铃薯葡萄糖琼脂PDA(含氯霉素):霉菌和酵母菌计数分离常用培养基

2026-06-22 17:37:59
逗点生物
简介

马铃薯葡萄糖琼脂PDA(含氯霉素):霉菌和酵母菌计数分离常用培养基

产品信息与用途

项目 内容
产品名称 马铃薯葡萄糖琼脂PDA(含氯霉素)
英文名称 Potato Dextrose Agar (Chloramphenicol)
货号 GF1093
产品规格 250 g/瓶
保质期 未开封三年
产品用途 供霉菌和酵母菌计数及分离培养
参考用途 适用于食品微生物检验中霉菌、酵母菌的培养观察
培养条件 28±1℃培养5 d,具体按检测方法执行
典型结果 酵母菌形成奶油色菌落;黑曲霉可形成白色菌丝并产生黑色孢子

配方组成及作用

成分 用量 主要作用 用途说明
马铃薯 300.0 g/L,鲜马铃薯浸出物等效量 提供淀粉降解产物、维生素、矿物质和生长促进物质 有助于霉菌菌丝生长、产孢及酵母菌恢复生长
葡萄糖 20.0 g/L 主要碳源和能源 促进霉菌、酵母菌生长和菌落形成
琼脂 15.0 g/L 凝固剂 形成固体平板,便于菌落计数、分离和形态观察
氯霉素 0.1 g/L 广谱抑菌剂 抑制多数细菌生长,降低细菌背景干扰
干粉用量 40.1 g/L 商品化配制量 按标签称取本品40.1 g配制1 L培养基

培养基原理

PDA培养基适合霉菌和酵母菌生长,主要原因在于马铃薯浸出物和葡萄糖的配合。马铃薯浸出物含有多种天然营养成分,可促进霉菌菌丝伸展和产孢;葡萄糖是多数真菌易利用的碳源,可为细胞增殖和代谢提供能量。对霉菌而言,PDA常用于观察菌落颜色、质地、菌丝扩展和孢子形成;对酵母菌而言,则可用于菌落计数和分离培养。

氯霉素通过抑制细菌蛋白质合成发挥抑菌作用,对许多革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有抑制效果。由于霉菌和酵母菌属于真核微生物,对氯霉素的敏感性通常低于细菌,因此在适当浓度下可实现“抑制细菌、保留真菌生长”的效果。但氯霉素并不能抑制所有细菌,也不能替代规范的样品处理、无菌操作和后续鉴定。

使用方法

称取本品40.1 g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解。分装三角瓶后,于121℃高压灭菌15 min,冷却至适宜温度后倾注平板或按检测方法要求使用。

配制时应充分加热溶解,避免琼脂未完全溶化导致凝固不均。由于培养基中含有葡萄糖和氯霉素,不建议随意延长灭菌时间或反复加热,以免造成成分稳定性下降、颜色加深或培养性能波动。灭菌后若出现明显沉淀、焦糖化颜色异常、污染或凝固不良,应停止使用。

质量控制

按标签方法制备培养基后,接种质控菌株,于28±1℃培养5 d,观察菌落生长和选择性。

质控指标 质控菌株及编号 质控评定标准
生长率 酿酒酵母 ATCC 9763 PR≥0.7,形成奶油色菌落
生长率 黑曲霉 ATCC 16404 PR≥0.7,形成白色菌丝、黑色孢子
选择性 大肠埃希氏菌 ATCC 25922 G≤1,生长受抑制
选择性 金黄色葡萄球菌 ATCC 6538 G≤1,生长受抑制

其中,PR≥0.7表示培养基应能有效支持目标真菌生长;G≤1表示细菌受抑制或仅有极弱生长。若酿酒酵母或黑曲霉生长不良,应重点检查培养基称量、灭菌条件、培养温度、培养时间、平板干燥程度和菌株活性。若大肠埃希氏菌或金黄色葡萄球菌生长明显,则应关注氯霉素含量、培养基保存状态、灭菌过程及是否存在配制误差。

操作与储存注意事项

本品不得用于临床检验。干粉培养基称量时应注意粉尘防护,建议佩戴口罩,避免吸入粉尘引起呼吸道不适。干粉使用后应立即密封,置于避光、干燥处保存,防止吸潮结块。未开封产品在规定条件下保质期为三年;开封后受环境湿度、密封状态和取用频次影响,保质时间可能缩短,应根据实际保存状态评估。

霉菌培养过程中容易产生孢子扩散,操作时应尽量减少平板开启时间,避免交叉污染。检测后的带菌平板、吸头、接种工具及其他污染物,应按实验室生物安全要求处理,建议经121℃高压灭菌30 min后再废弃。